在生化科研的過程中,，使用標(biāo)準(zhǔn)受體干細(xì)胞系（如：大腸桿菌,、酵母菌、CHO細(xì)胞系等等）進(jìn)行研究已經(jīng)是非常常規(guī)的手段,。在使用各種細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,，保存細(xì)胞樣本就成了*的一步。一般來說保存細(xì)胞是為了能夠再次使用,，所以使用什么方法保存,、能保存多長(zhǎng)時(shí)間也就至關(guān)重要。當(dāng)再次使用自己保存的細(xì)胞時(shí),，我們肯定不想發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)滿雜菌的樣本,，或是都死了的樣本、亦或者蛋白表達(dá)不出來的樣本,。那今天就來說說常見的一些保存細(xì)菌細(xì)胞樣本的方法和時(shí)限,。
幾種保存方法
一個(gè)zui基本的概念：保存溫度越低，保存時(shí)限更長(zhǎng),；溫度越低,，對(duì)細(xì)胞傷害越大；低溫也不怕,，我有防凍劑（e.g.甘油）,。下面的表格就是五種常見保存細(xì)菌細(xì)胞的方法和大約時(shí)限。
保存條件    溫度°C    大約時(shí)間
瓊脂平板            4             4-6周
    （AgarPlate）                                                                                
穿刺培養(yǎng)基         4            3周-1年                                                         
（stabculture）                                                                            
 冰凍                  -20         1-3年                                                            
超低溫冰凍       -20         1-10年                                                    
凍干                   ≤4         15年+                               
    但是,，具體到你用的那一種菌用什么方法保存能夠保存多長(zhǎng)時(shí)間,，就要視情況而定了,，并沒有一個(gè)*答案，上表中所列出來的時(shí)限一般來說是適用大部分細(xì)菌樣本的,。小編如果要保存一個(gè)細(xì)胞樣本,，一般不會(huì)費(fèi)時(shí)費(fèi)力來查這個(gè)表的，那怎么辦,？問師兄，找?guī)熃憧﹡
短期保存
上表中的瓊脂平板和穿刺培養(yǎng)基都適合于短期保存,。這兩種方法都保存在4度冰箱,，為避免雜菌，用塑料或封口膜（parafilm）對(duì)平板或培養(yǎng)瓶進(jìn)行封口,，這樣可以拒絕冰箱內(nèi)本身存在的雜菌,、霉菌入侵樣本，也可以防止自己的培養(yǎng)基過快失水而變得干燥,。小編就曾有一盤放在4度冰箱的菌落樣本,，忘記了封口，一個(gè)月后,，干細(xì)胞菌落和瓊脂都變成了木乃伊T_T
長(zhǎng)期保存
長(zhǎng)期低溫冰凍必然會(huì)導(dǎo)致部分細(xì)胞死亡,，而且很多時(shí)候我們要把細(xì)胞樣本拿來重新接種做實(shí)驗(yàn)，所以解凍再凍的過程也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。那么起始樣本的細(xì)胞濃度就要達(dá)到一定的高度,，這樣在以后保存的過程中就算死亡一些細(xì)胞，我們也還有很多有效細(xì)胞可以用,，一般來說這個(gè)起始細(xì)胞密度要達(dá)到10的七次方的樣子（單位：細(xì)胞/mL）,。
除了常見抗凍劑甘油外，我們也會(huì)添加多糖（polysaccharide）或者葡聚糖（dextran）或某些蛋白質(zhì)用來吸附在細(xì)胞表面形成保護(hù)薄膜,，防止在冷凍過程中對(duì)細(xì)胞的破壞,。
另外在解凍細(xì)胞樣本的時(shí)候，在低溫條件下,，不要讓整個(gè)細(xì)胞樣本解凍成液體,，只要解凍到少量液態(tài)樣本出現(xiàn)就好。這樣也可以幫助更多的樣本存活過一次解-再凍的過程,，方便下次或多次使用,。
關(guān)于凍干保存，其實(shí)并不是所有的細(xì)菌都適合凍干,，有的細(xì)菌沒法在凍干過程中存活,。所以如果你實(shí)在需要超長(zhǎng)時(shí)間保存（超過十年）你的樣本，一定要自己驗(yàn)證一次,，看凍干細(xì)胞再培養(yǎng)能不能成功