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1819次細胞進行免疫熒光染色，主要有兩種方法：直接法和間接法,。
1.直接免疫熒光標記法的樣品制備取細胞(約1×106個／m1),，在每一管中分別加入適量熒光素標記的一抗，充分混勻(如做雙標或多標染色,，可把幾種標記有不同熒光素的抗體同時加入),，孵育20～60min后，用PBS洗1～2次,，離心收集細胞,，加入緩沖液重懸，上機檢測,。直接染色法抗體較貴,，但操作簡便，結果準確,，適用于同一細胞群多參數(shù)同時測定,。
2．間接免疫熒光標記法的樣品制備取一定量的細胞懸液(約1×106個細胞／ml)，先加入特異的*抗體,，待反應*后洗去未結合抗體,，再加入熒光標記的第二抗體，生成抗原,，抗體-抗抗體復合物,，以FCM檢測其上標記的熒光素被激發(fā)后發(fā)出的熒光。本方法費用較低,，二抗應用廣泛,，多用于科研標本的檢測。但由于二抗一般為多克隆抗體,，特異性較差,，非特異性熒光背景較強，易影響實驗結果,。所以標本制備時應加入陰性或陽性對照,。另外，由于間接法步驟較多,，增加了細胞的丟失,，不適用測定細胞數(shù)較少的標本。
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