生物分析法 生物分析法方便,，敏感性高,，但所有細胞系有可能受幾種細胞因子的影響,，特異性則較差。又由于可溶性細胞因子受體等抑制劑的存在,，使生物分析法可能低估細胞因子的活性,。常用的方法有2種:(1)依賴性細胞株增敏實驗。一些腫瘤細胞株依賴于細胞因子方能在體外增殖,，如TF-1細胞株依賴于GM-CSF和IL-3 ,，CTLL細胞株依賴于IL-2，TTD-1細胞株依賴于IL-6等,?？衫眠@些依賴株檢測相應(yīng)的細胞因子。但是,，并非所有細胞因子均有相應(yīng)的依賴株,，因此限制了此法的應(yīng)用。(2)功能檢測實驗,。利用一些細胞因子的功能特性而建立相應(yīng)的活性測定方法,。如IFN抗病毒實驗和tnf對L 929 細胞的殺傷作用等。此外,，生物分析法還有骨髓集落形成實驗,，細胞毒或細胞抑制實驗，次級分子分泌的誘導(dǎo),，化學(xué)趨化和細胞因子分泌性的抑制實驗等,。

免疫分析法 利用抗原機體反應(yīng)的原理，制備出抗細胞因子的單抗或多抗,，可進行細胞因子的免疫檢測,，它包括放免實驗(RIA)和酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)等。其優(yōu)點是高特異性,、高靈敏度,、操作簡便。缺點是不能證明被測細胞因子是否為具有完整生物活性結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)而非變性蛋白質(zhì),。

CKmRNA的測定 (1)分子雜交實驗:首先制備出細胞因子的基因探針,，通過分子雜交檢測細胞內(nèi)CKmRNA的表達。(2)逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)法技術(shù):可快速,、靈敏地檢測表達很低的CKmRNA,，并可同時測定同一樣本中多種CKmRNA，操作過程包括細胞因子產(chǎn)生細胞的RNA提取,，mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA,，以cDNA為模板，在細胞因子引物的引導(dǎo)下,，即可進行PCR擴增,。根據(jù)定量CKmRNA方法和原理的不同,，可分為半定量PCR法，競爭性定量PCR法,，內(nèi)參標(biāo)定量PCR法,，HPLC-PCR法和酶聯(lián)免疫定量PCR法。目前市售的商品試劑盒已能用于大多數(shù)細胞因子的檢測,，但因其價格昂貴而阻礙了其廣泛使用,。同時，人細胞因子的測定仍存在許多問題,，檢測方法選擇不當(dāng)可能得到不一致的結(jié)果,，有時有必要選擇一個以上的檢測方法測定細胞因子。