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人維生素B12(VB12)elisa試劑盒樣品收集,、處理及保存

時(shí)間:2024/7/15閱讀:198
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人維生素B12(VB12)elisa試劑盒樣品收集,、處理及保存

1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無菌管收集細(xì)胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。

2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè),。

3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測(cè),。

4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清。

5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。

6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,,加入500ul 的PBS,,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。

7. 樣品中不能含有NaN3,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。

8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,,-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心,。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。


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