人胸腺五肽(TP-5)elisa試劑盒操作步驟樣品收集,、處理及保存:
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份,。用無菌管收集細胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,,調整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,,或 者細胞超聲粉碎,,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,,以1000×g離心15分鐘,取上清待測,。
4. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清,。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,,分泌物等,。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,,加入500ul 的PBS,,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,,應將其分裝,-70 ℃保存,,避免反復冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心,。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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