人血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒洗滌方法：

1. 自動洗板機：每孔加入洗滌液350μl,，注入與吸出間隔60秒。洗板5次,。

2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體,，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl,，浸泡1-2分鐘,，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干,。洗板5次,。

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫,；試劑或樣品配制時,，均需充分混勻，并盡量避免起泡,。

1.加樣：分別設空白孔,、標準孔、待測樣品孔,?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl,，注意不要有氣泡,，加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。給酶標板覆膜，37℃孵育2小時,。為保證實驗結(jié)果有效性,，每次實驗請使用新的標準品溶液,。

2.棄去液體，甩干,，每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),，酶標板加上覆膜，37℃溫育1小時,。

3.棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板 3次,，每次浸泡1-2分鐘,，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干,。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,，加上覆膜，37℃溫育1小時,。

5.棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板5次,，方法同步驟3,。

6.每孔加底物溶液100μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,，但不可超過30分鐘,。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時,，即可終止),。

7.每孔加終止液50μl，終止反應,，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。

8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值),。應提前打開酶標儀電源，預熱儀器,，設置好檢測程序,。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

人胚肺二倍體細胞,；KMB-17

人胚腎細胞,；293 [HEK-293]

人臍靜脈內(nèi)皮細胞；HUV-EC

人肺細胞,；HLF-a

人胚肺成纖維細胞,；WI-38 [WI38]

人胎兒胸腺細胞株,；HFT-8810 [HFT8810]

人胚肺成纖維細胞；HFL1

人胚腎細胞,；293 [HEK-293]

人羊膜細胞,；HA

人胚肺成纖維細胞；HFL-I

人肝細胞,；HL-7702[L-02]

人肝細胞,；QSG-7701 [QSG7701]

人胚肺成纖維細胞；WI-38 [WI38]

人張氏肝細胞,；Chang liver

人羊膜細胞,；WISH

人胚肺成纖維細胞；MRC-5

人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞,；CCD-1095Sk

人正常乳腺細胞,；Hs 578Bst

人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞；NK-92 [NK92]

人B淋巴母細胞,；HMy2.CIR

人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞,；NK-92MI [NK92MI]

人臍靜脈內(nèi)皮細胞；HUV-EC-C

人正常乳腺上皮細胞,；MCF 10A

人胚腎細胞,；2V6.11

人正常肺上皮細胞；BEAS-2B

人肺成纖維細胞,；HFL1

人胚肺成纖維細胞,；IMR-90