人D-乳酸ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一,、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,，然后在di一,、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻,；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,，再在第三,、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻,；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五,、第六孔中,，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,，混勻,；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中,，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七,、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L,，120 ng/L ,，60 ng/L，30 ng/,，15 ng/L）,。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）,、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3,。

8. 洗滌：操作同5,。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零,，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

恒河猴腎細(xì)胞,；RM-1

EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞,；B95-8

恒河猴腎細(xì)胞；MMK2

恒河猴腎細(xì)胞,；MMK3

恒河猴肺細(xì)胞,；RM-L1

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞；COS-1

恒河猴腎細(xì)胞,；RM-2

恒河猴腎細(xì)胞,；RM-3

恒河猴皮膚細(xì)胞；RM-S1

獼猴肌肉細(xì)胞,；MMm7

獼猴皮膚細(xì)胞,；MMS4

獼猴皮膚細(xì)胞；MMS7

獼猴肺細(xì)胞,；MML2

魚源細(xì)胞

斑馬魚尾鰭細(xì)胞,；AB.9

草魚腎細(xì)胞；GIK

草魚肝臟細(xì)胞,；L8824

草魚腎細(xì)胞,；GIK

團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞；WCF

白鰱尾鰭細(xì)胞系,；SCF

散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞,；YZ21

鯉魚尾鰭細(xì)胞；YZ16

高背鯽魚尾鰭細(xì)胞,；GBJd

興國(guó)鯉尾鰭細(xì)胞,；XGL

蚊源細(xì)胞

蚊子幼蟲體細(xì)胞；Aedes albopictus clone C6/36

幼蚊細(xì)胞,；C6/36