昆蟲卵巢細胞；Sf21復蘇操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱,；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基,。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出,，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水,，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管,，使細胞能在1~2min內*解凍,，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中,，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染,。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內,，輕輕吹打液體,，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度,，吹打時避免產(chǎn)生氣泡,。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內,。

4）800rpm離心5min，棄上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,，補加適量的培養(yǎng)基,，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng),。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況,，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代,。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗,。

HuH-7人肝癌細胞

RBE, 人肝膽管癌細胞

MiaPaCa-2, 人胰腺癌細胞

KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細胞

QGY-7701, 人肝癌細胞

PANC-1, 人胰腺癌細胞

U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞

Hep G2, 人肝癌細胞系

PC-12(高分化),，PC12,，大鼠腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞株(高分化)

GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤

Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞

QBC-939, 人膽管癌細胞

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉移細胞

SGC-7901, 人胃腺癌細胞系

SK-N-SH, 人神經(jīng)母細胞瘤細胞

SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細胞

A549, 人肺癌細胞系

SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐藥細胞株

A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株

A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株

SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞

WM35, 人黑色素瘤細胞

BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細胞株

U-2 OS, 人骨肉瘤細胞

WM451, 人黑色素瘤細胞

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細胞