四角瑞氏絳蟲PCR試劑盒使用方法:
一,、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）,。由于標準品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）,。
1. 標記 6 個離心管,，分別為 7，6,，5,，4，3,，2,。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭,，下同）,。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供),，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用,。
4. 換槍頭,，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用。
5. 換槍頭,，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用,。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用,。
二,、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容,。
8. 如果有 N 個樣品,，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管,、另一個用作樣品制備陰性對照管,。
三、設置 qPCR 反應（20μL 體系,，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板）,，6 個用于標準曲線。如果做定性分析,，并且只做 1 次重復,，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板）,，1 個用于PCR 陽性對照。

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