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鴨子碳酸酐酶(CA)elisa試劑盒操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔,、陽性對照 2 孔,、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,,然后再加待測樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置 30 秒后棄去,,如此 重復 5 次,拍干,。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3,。
8.洗滌:操作同 5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色),。
11.測定:以空白空調(diào)零,,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行,。
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