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IgA elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作技巧:
1.操作前應對試驗的物理參數(shù)有充分的了解,,如環(huán)境溫度(保持在18 C~25℃),、反應孵育溫度和孵育時間、洗刷的次數(shù)等,,要先查看水育箱溫度,,ELISA試劑盒是否符合要求。
2.正確使用加樣器加樣器應筆直參加標本或試劑,,避免刮擦包被板底部,。加樣過程中避免液體外濺,,血清殘留在反應孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,,避免污染,,加樣次第要與說明書一起,否則可導致效果過錯,,試驗重復性差,。
3.手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要逾越說明書舉薦的洗刷次數(shù),,洗液在反應孑L內(nèi)停留的時間不宜太長,。不要使洗液在孑L間竄流,形成孔問污染,,導致假陰性或假陽性,。
4.要保證加液量一起 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,,形成顯色不一致,,判別過錯。
5.顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,,加顯色系統(tǒng)后要避光反應,,顯色液量不能過多,避免顯色過強,。
血漿:
應根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA ,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合10-20 分鐘后,,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分),。仔細收集上清。如有沉淀形 成,,應再次離心,。
尿液、胸腹水,、腦脊液:用無菌管收集,,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分),仔細收集上清,。如有沉淀形成,,應再次離心。
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