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赤點石斑魚神經(jīng)壞死病毒(RGNNV)RNA核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,,引物和水共15 μL 混合后,,直接進(jìn)行PCR反應(yīng)(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),,反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果,。
使用方法 :
1 實驗所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應(yīng)管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
赤點石斑魚神經(jīng)壞死病毒(RGNNV)RNA核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,,各區(qū)實驗服、儀器 ,、耗材應(yīng)獨立使用,,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2. 為避免RNA降解,,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測,;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照,。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),,并單獨存放,。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記,。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用,。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄,。
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