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爾斯布朗病毒PCR試劑盒使用步驟

時(shí)間:2020/2/25閱讀:664
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爾斯布朗病毒PCR試劑盒使用步驟:
注:爾斯布朗病毒PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)所有試劑使用前需*解凍,,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用,。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū),;陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,,可直接使用,。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl,、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管),。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū),。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,,蓋緊管蓋,,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū),。

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