植物生長素(IAA)試劑盒操作步驟
1)使用前,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2)根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數,。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔,。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔,、加入待測樣品50ul于反應孔內,。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數增加一次,。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次,。
7)每孔加入底物A,、B各50ul,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘,。避免光照。
8)取出酶標板,,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應立即測定結果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
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