1.包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類,。天然蛋白需經純化才能用直接吸附法包被,，對于含雜質較多的抗原可以采用間接捕獲法包被(先用能夠與目的抗原反應的物質如抗體直接吸附在酶標板上,，再通過特異性反應使抗原固相化),。經純化的重組蛋白一般皆可直接包板,。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機化合物，由于分子量太小,，往往難于直接吸附在酶標板上,，一般都先使其與無關蛋白質如BSA等偶聯，偶聯物吸附于固相載體上,。

3.包被溫度的選擇通常是4-8度條件下過夜或者37度保溫2小時,，我們強烈建議4-8度條件下包被，有利于蛋白活性的保持,。

2.包被液的選擇一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,，如果包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話，也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液,。

4. 包被濃度的選擇包被的適濃度隨固相載體和包被物的性質變化,，一般蛋白質的包被濃度為1-5ug/ml，要明確針對特定包被抗原的適包被濃度需要通過實驗來確定,。包板后需要封閉嗎?應該選擇什么樣的封閉體系?封閉是否必要,，取決于ELISA的模式及具體的實驗條件。一般說來,，雙抗體夾心法,，只要酶標記物是高活性的，操作時洗滌*,，不經封閉也可得到滿意的結果,。而在間接法測定中，封閉一般是*的,。常用的封閉劑有0.05%-0.5%的BSA,、 10%的小牛血清、1%明膠,、5%的脫脂奶粉,，AbMART推薦使用5%脫脂奶粉，價廉而且封閉能力強,，不過5%脫脂奶粉只適合短期內使用,，不宜長期保存，所以ELISA試劑盒中較少使用,。

今天小編教您如何選擇優(yōu)化的包被條件?

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