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ELISA測定試劑盒:抗體檢測基本原理:
1,、加入底物,,酶作用底物,使之變色,。底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,。
2、產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),,故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺有無定性或定量分析,。
3、將特定抗體(一抗)結(jié)合到某種固相載體表面,,并保持其免疫性,。一抗是待測抗體的抗體,識別待測抗體,。
4,、測定時,固定的一抗先與樣品稀釋液反應(yīng),,將樣品中待測抗體固定,;洗滌后再與二抗反應(yīng)。每一步之間都要進行洗滌,。
5,、二抗是一種與酶偶聯(lián)的抗體,既保留了其免疫活性,,又保留了酶的活性,。二抗識別并結(jié)合待測抗體,。
ELISA測定試劑盒操作事項:
1、使用前,,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2、當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,,避免起泡,。
3、洗滌過程非常重要,,不充分的洗滌易造成假陽性,。
4、在配制標(biāo)準(zhǔn)品,、檢測溶液工作液時,,請以相應(yīng)的稀釋液配制,ELISA試劑盒不能混淆,。
5,、底物請避光保存。
6,、控制好每一步的操作時間,。
7、一次加樣時間較好控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
8,、請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,較好做復(fù)孔。
9,、如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,,請先稀釋后再測定。
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