ELISA測定試劑盒:抗體檢測基本原理:
1、加入底物,,酶作用底物,,使之變色。底物被酶催化變?yōu)橛猩a物。
2,、產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,,故可根據顏色反應的深淺有無定性或定量分析。
3,、將特定抗體(一抗)結合到某種固相載體表面,,并保持其免疫性。一抗是待測抗體的抗體,,識別待測抗體,。
4、測定時,,固定的一抗先與樣品稀釋液反應,,將樣品中待測抗體固定;洗滌后再與二抗反應,。每一步之間都要進行洗滌,。
5、二抗是一種與酶偶聯(lián)的抗體,,既保留了其免疫活性,,又保留了酶的活性。二抗識別并結合待測抗體,。
ELISA測定試劑盒操作事項:
1,、使用前,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,,產生加樣上的誤差,。
2、當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,,避免起泡,。
3、洗滌過程非常重要,,不充分的洗滌易造成假陽性,。
4、在配制標準品,、檢測溶液工作液時,,請以相應的稀釋液配制,ELISA試劑盒不能混淆,。
5,、底物請避光保存。
6、控制好每一步的操作時間,。
7,、一次加樣時間較好控制在5分鐘內,如標本數量多,,推薦使用排槍加樣,。
8、請每次測定的同時做標準曲線,,較好做復孔,。
9、如標本中待測物質含量過高,,請先稀釋后再測定,。
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