C肽放免試劑盒試驗原理,、方法   C-P 免放藥盒是一種固相“三明治”夾心式免疫放射量度分析,，由兩株單克隆 抗體識別和分析。兩株單克隆抗體分別抗 C-P 分子相距很遠(yuǎn)的兩個位點：株單 抗包被于試管底部內(nèi)壁,；第二株單抗用 125I 進(jìn)行放射性標(biāo)記,，用作示蹤劑。存在于 標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品中的 C-P 分子被夾在兩株單抗之間,。過量未結(jié)合的示蹤劑在洗滌 過程中容易地被除去,，而抗體僅保留了被吸附的抗體-抗原-示蹤劑結(jié)合物。結(jié)合在 包被管上的放射活性的量與測定開始時存在的 C-P 的量成比例,。

由于 C-P 極不穩(wěn)定,，溶解后需立即使用，其余溶液按每次使用量分裝后置-20℃可 儲存 3 個月,，只能凍融一次,，避免反復(fù)凍溶。

【適用儀器】 1,、γ－計數(shù)器 2,、振蕩器

【樣本要求】 110 微升人血清樣本。 采靜脈血 5ml 于塑料試管中,，靜置使其凝固后,，1500 轉(zhuǎn)／分離心，取其上清液,， 放置玻璃瓶中,。如果樣本不立即使用，可在-25℃~-18℃儲存 6 個月,。

【試驗方法】

1,、 將實驗所需試劑及樣本放置室溫，平衡至少 30 分鐘以上才可進(jìn)行操作,； 標(biāo)準(zhǔn)品用 1.0ml 去離子水溶解后輕輕搖勻,，放置 10min 左右方可使用,。

2、 打開包被試管包,，取出包被管進(jìn)行編號,，所有實驗均做雙管重復(fù)；

3,、 取每個濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,、質(zhì)控血清和樣本 100µl 加入相應(yīng)編號的試管中；

4,、 每管均各加入 100µl 標(biāo)記抗體液,，室溫（17-27℃）振蕩 1 小時后，吸干 或倒出,；

5,、 每管均各加入 2ml 洗滌液后，吸干或倒出,，再重復(fù)操作一遍此步驟,；

6、 用 γ-計數(shù)器測定每管 1 分鐘的放射性強(qiáng)度計數(shù),；

7,、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。