ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種：

1． 內(nèi)源性物質(zhì)

普遍認為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可以不同程度影響檢測結(jié)果,。常見的干擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子,、補體,、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體,、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig （s）抗體,、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。

（1）類風(fēng)濕因子

人血清中IgM,、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的FC段直接結(jié)合,，從而導(dǎo)致假陽性。解決該情況的辦法是：①用F（ab）2替代完整的IgG,；②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性（63℃,，10 min）IgG的固相吸附劑處理（將熱變性IgG加入到標(biāo)本稀釋液中同樣有效）；③檢測抗原時,，可以用2-巰基乙醇等加入到標(biāo)本稀釋液中,，使RF降解。

（2）補體

ELISA系統(tǒng)中固相一抗和標(biāo)記二抗過程中,，抗體分子發(fā)生變構(gòu),，其FC段的補體C1q分子結(jié)合位點被暴露出來，使C1q 可以將二者連接起來,，從而造成假陽性,。解決的辦法是：①用EDTA稀釋標(biāo)本,；②用53℃，10 min或56℃,，30 min加熱血清使C1q滅活,。

（3）嗜異性抗體

人類血清中含有能與嚙齒類動物（如鼠等）Ig （s） 結(jié)合的天然嗜異性抗體，可將ELISA系統(tǒng)中一抗和二抗連接起來,，也能造成假陽性,。解決的辦法是：可在標(biāo)本稀釋液中加入過量的動物Ig （s） ，但加入量不足或亞類不同時無效,。

（4）嗜靶抗原的自身抗體

抗甲狀腺球蛋白,、抗胰島素等嗜靶抗原的自身抗體，ELISA試劑盒有時能與靶抗原結(jié)合形成復(fù)合物,，在ELISA方法中均可干擾抗原抗體測定結(jié)果,。為避免以上情況出現(xiàn)，解決的辦法是：測定前需用理化方法將其解離后再測定,。

（5）醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig （s） 抗體

人ELISA試劑盒臨床開展的用鼠源性CD3等單克隆抗體治療,，用放射性同位素標(biāo)記鼠源性抗體的影像診斷及靶向治療等新技術(shù)，均有可能使這些病人體內(nèi)產(chǎn)生抗鼠抗體,；另外,，被鼠等嚙齒類動物咬傷的病人體內(nèi)也可以產(chǎn)生抗鼠Ig （s） 抗體。這些病人ELISA測定時均可產(chǎn)生假陽性,。解決的辦法是：測定抗原時,，在標(biāo)本中加入足量的正常鼠Ig （s） ，從而克服由于上述原因造成的假陽性,。

（6）交叉反應(yīng)物質(zhì)

類di高辛,、類AFP樣物質(zhì)等，是與靶抗原有交叉反應(yīng)的物質(zhì),。在用多抗測定抗原時對測定結(jié)果影響不大,，但在用單克隆抗體測定抗原時，如果交叉抗原決定簇正好是所用單克隆抗體相對應(yīng)的靶決定簇時,，也會出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

（7）標(biāo)本中其它成分的影響 血清脂質(zhì)過高,、膽紅素,、血紅蛋白及血液粘度過大等，均對ELISA測定結(jié)果有干擾作用,。