若用保溫箱，小鼠elisa檢測(cè)試劑盒板應(yīng)放在濕盒內(nèi),，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,，在盒底墊濕的紗布，zui后將ELISA檢測(cè)試劑盒板放在濕紗布上,。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度,，特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此。

    無論是水浴還是濕盒溫育,，反應(yīng)板均不宜疊放,，以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應(yīng),，操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi),，標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃,，但具體操作時(shí)可根據(jù)說明書的要求控制溫育。室溫溫育時(shí),，ELISA檢測(cè)試劑盒板只要平置于操作臺(tái)上即可,。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn),，一個(gè)人操作時(shí),，一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定。ELISA檢測(cè)試劑盒屬固相免疫測(cè)定,，抗原,、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被為例,，加入板孔中的標(biāo)本,，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸,。這是一個(gè)逐步平衡的過程,，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此,。這就是為什么ELISA檢測(cè)試劑盒反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育,。 
    溫育常采用的溫度有43℃、37℃,、室溫和4℃（冰箱溫度）等,。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度,。在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí),，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí),，產(chǎn)物的生成可達(dá),。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度,，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行,，但不宜采用更高的溫度。