ATCC細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以zui大限度的保存細(xì)胞活力,。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷,。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷,。
    細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng),、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段,。在細(xì)胞建株和建系中,，及時凍存原始細(xì)胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中,，雜交瘤細(xì)胞,、每次克隆化得到的亞克隆細(xì)胞的凍存保種常常是*的實(shí)驗(yàn)操作。因?yàn)樵跊]有建立一個穩(wěn)定的細(xì)胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞系的時候，細(xì)胞的培養(yǎng)過程中隨時可能因細(xì)胞的污染,、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗,，如果沒有原始細(xì)胞的凍存，則因?yàn)樯鲜龅囊馔舛肮ΡM棄,。
1,、常用凍存液組成成分
20％血清（FBS）、10％DMSO,、70％1640培養(yǎng)液,；或90％血清（FBS）、10％DMSO,，更可防止細(xì)胞內(nèi)冰晶形成,。將DMSO和FBS加入DMEM中，各自含量占總體積的10%,，然后濾膜過濾后分裝保存?zhèn)溆谩?br />2,、DMSO在凍存液中的作用
DMSO在4℃時對細(xì)胞無明顯毒性，分子量小,、溶解度大,、易透過細(xì)胞膜，降低細(xì)胞外未結(jié)冰溶液中溶質(zhì)濃度,，使ATCC細(xì)胞免受高濃度溶質(zhì)的損傷,細(xì)胞內(nèi)水分也不會過分外滲,，避免了細(xì)胞過分脫水皺縮；DMSO與水分子結(jié)合,，可使冰點(diǎn)下降,，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少冰晶損傷,。
3,、注意事項(xiàng)     
  1.DMSO 不用高壓滅菌；DMEM不能高溫高壓滅菌,，可以過濾除菌,。
  2.DMSO要用新的，而且要避光保存,。
  3.DMSO：含10%FBS的DMEM=1:9(體積比),。

 新型血管活性因子UCN(小鼠、大鼠)IgG 大鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)

 新型抑癌基因/一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因IgG 大鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)

 新型抑癌基因IgG 大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9) 

 新型抑癌基因IgG 大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)

 信號調(diào)節(jié)蛋白αIgG 大鼠骨粘連蛋白(ON)

 信號通路WNT10AIgG 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)

 信號通路WNT10BIgG 大鼠骨形成蛋白(BMPs)

 信號通路Wnt1IgG 大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)

 信號通路Wnt2BIgG 大鼠骨橋素(OPN)

 信號通路Wnt3aIgG 大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)

 信號通路WntIgG 大鼠骨堿性磷酸酶(BALP)
ATCC細(xì)胞