1. 腫瘤細胞實驗進行前,，無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌,，以70 %ethanol 擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,，以避免失誤混淆或細胞間污染,。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺,，以70 % ethanol 擦拭無菌操作抬面,。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10 分鐘以上后，再進行下一個細胞株之操作,。
 
2. 無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,，必要物品，例如試管架,、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置,，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流之流通,。實驗用品以 70 % ethanol 擦拭后才帶入無菌操作臺內,。實驗操作應在抬面之中央無菌區(qū)域，勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作,。
 3. 小心取用無菌之實驗物品,，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,，亦不要在打開之容器正上方操作實驗,。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45° 角取用,，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面,。
 4. 工作人員應注意自身之安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗,。對于來自人類或是病毒感染之腫瘤細胞應特別小心操作,，并選擇適當等級之無菌操作臺(至少 Class II)。操作過程中,，應避免引起aerosol 之產生,，并避免尖銳針頭之傷害等。
 5. 定期檢測下列項目： 5.1. CO2 鋼瓶之CO2壓力 5.2. CO2 培養(yǎng)箱之CO2濃度,、溫度,、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水，每周更換),。 5.3. 無菌操作臺內之airflow 壓力,，定期更換紫外線燈管及HEPA 過濾膜，預濾網(300小時/預濾網,，3000 小時/HEPA),。
 6. 水槽可添加消毒劑(Zephrin 1:750)，定期更換水槽的水
 7. 認真按照操作規(guī)程進行實驗,，一般不大會導致污染,，很多情況下是由于所用的試劑或培養(yǎng)基有污染而使實驗失敗，粉末培養(yǎng)基配制好后(加了血清),，一般在4度盡量不要超過1個月,，如在-20度存放時間可長一些，但也不要超過3-4個月,，可能對于永生化細胞株來說要求不是太高,，但我在過去的4年里一直是作原代 細胞培養(yǎng) 的，細胞嬌弱,，經驗表明放置時間不宜過長,。
 8. 許多塑料制品也可以高壓消毒，例如培養(yǎng)瓶蓋,，膠塞,，吸頭等。不能用于高壓的一般均已制成一次性作用的商品了,，當然如果 money有限,，如進口的培養(yǎng)板、皿等,，也可以重復使用1-2次,，我當時使用方法是將其*清潔后,，使用前在紫外燈下敞開照射1-1.5h即可，我做過多次,，沒有出現問題,。腫瘤細胞塑料培養(yǎng)瓶由于清洗消毒不便，不要重復使用,，如一定要重復用,，可用環(huán)氧乙烷等消毒，(消毒后一定要放置半年以上方可使用)