ATCC細胞取材進行原代培養(yǎng)時常常需要將組織塊消化解離形成細胞懸液,，傳代培養(yǎng)時也需要將貼壁細胞從瓶壁上消化下來,，常用的消化液有胰酶(Trypsin)溶液和edta溶液,，有時也用膠原酶(collagenase)溶液。
 
1.胰酶溶液：胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示,，常見有1：125和1：250,，即一份胰酶可消化125或250份酪蛋白。組織培養(yǎng)用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%濃度,，配制時要用不含Ca2+,、Mg2+及血清的平衡鹽溶液(如前面的D-Hank"s)，因為這些物質(zhì)會對胰酶產(chǎn)生抑制作用,。胰酶作用及溶解的*pH是8-9,，配制胰酶溶液應將液體調(diào)至pH8左右，充分溶解,，過濾除菌,。過濾后可以再調(diào)只pH7.5，也可不調(diào),。
 
使用細胞清洗液配制胰酶消化液：含0.5%胰酶的ATCC細胞清洗液(100ml細胞清洗液加0.5g胰酶),，過濾除菌，分裝于4度保存,。
 
2.EDTA溶液：EDTA溶液也常用來解離細胞,，它的作用機制是破壞細胞間的連接。對于一些貼壁特別牢固的細胞,，還可以用EDTA和胰酶的混合液進行消化,。EDTA溶液的使用濃度為0.02%，配制時應加堿助溶,，配制后可過濾除菌,，也可高溫消毒滅菌。
 
3.膠原酶溶液：膠原酶在上皮類細胞原代培養(yǎng)時經(jīng)常使用,，膠原酶作用的對象是膠原組織,，因此不容易對ATCC細胞產(chǎn)生損傷。膠原酶的使用濃度為0.1-0.3mg/L或200000U/L,作用的*pH為6.5,。膠原酶不受Ca2+,、Mg2+及血清的抑制，配制時可用PBS,。