ATCC細(xì)胞取材進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)常常需要將組織塊消化解離形成細(xì)胞懸液,，傳代培養(yǎng)時(shí)也需要將貼壁細(xì)胞從瓶壁上消化下來(lái),，常用的消化液有胰酶(Trypsin)溶液和edta溶液,，有時(shí)也用膠原酶(collagenase)溶液,。
 
1.胰酶溶液：胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示,，常見(jiàn)有1：125和1：250,，即一份胰酶可消化125或250份酪蛋白,。組織培養(yǎng)用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%濃度，配制時(shí)要用不含Ca2+,、Mg2+及血清的平衡鹽溶液(如前面的D-Hank"s),，因?yàn)檫@些物質(zhì)會(huì)對(duì)胰酶產(chǎn)生抑制作用。胰酶作用及溶解的*pH是8-9,，配制胰酶溶液應(yīng)將液體調(diào)至pH8左右,，充分溶解，過(guò)濾除菌,。過(guò)濾后可以再調(diào)只pH7.5,，也可不調(diào)。
 
使用細(xì)胞清洗液配制胰酶消化液：含0.5%胰酶的ATCC細(xì)胞清洗液(100ml細(xì)胞清洗液加0.5g胰酶),，過(guò)濾除菌,，分裝于4度保存。
 
2.EDTA溶液：EDTA溶液也常用來(lái)解離細(xì)胞,，它的作用機(jī)制是破壞細(xì)胞間的連接,。對(duì)于一些貼壁特別牢固的細(xì)胞，還可以用EDTA和胰酶的混合液進(jìn)行消化,。EDTA溶液的使用濃度為0.02%,，配制時(shí)應(yīng)加堿助溶，配制后可過(guò)濾除菌,，也可高溫消毒滅菌,。
 
3.膠原酶溶液：膠原酶在上皮類(lèi)細(xì)胞原代培養(yǎng)時(shí)經(jīng)常使用，膠原酶作用的對(duì)象是膠原組織,，因此不容易對(duì)ATCC細(xì)胞產(chǎn)生損傷,。膠原酶的使用濃度為0.1-0.3mg/L或200000U/L,作用的*pH為6.5。膠原酶不受Ca2+,、Mg2+及血清的抑制，配制時(shí)可用PBS,。