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新的常規(guī)C18液相色譜柱的活化及維護(hù),!
閱讀:18151 發(fā)布時(shí)間:2018-6-8 對(duì)于一根常用的C18柱,,拿到一根新柱的時(shí)候應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù),?為什么要這樣做?
新的色譜柱的活化,,實(shí)際上是一個(gè)平衡的過程,,除了用流動(dòng)相平衡外,有時(shí)候還必須用所測(cè)樣品對(duì)新柱進(jìn)行平衡,,特別是測(cè)定分子量比較高的多肽,,尤其重要。因?yàn)?,分子量高的物質(zhì)分子,,擴(kuò)散速度慢,平衡所需時(shí)間也相應(yīng)較長(zhǎng),。具體平衡方式也很簡(jiǎn)單,,多進(jìn)幾次樣品,直到峰面積和保留時(shí)間穩(wěn)定,,再進(jìn)行正式進(jìn)樣測(cè)定,。
如果要加快平衡時(shí)間,把前面用來平衡的進(jìn)樣樣品濃度加大,,或者不等洗脫完成,,連續(xù)進(jìn)樣多針。用待測(cè)物對(duì)新柱平衡,,目的是:將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點(diǎn)的吸附能力飽和掉,。