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技術文章

如何選擇色譜柱

閱讀:2257          發(fā)布時間:2018-3-19

       在選擇色譜柱之前,,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),,他們的類型結(jié)構、極性,、酸堿性,、分子量大小等等,   

1.樣品是極性的且弱酸性的,;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱   

2. 如果樣品極性太強,或酸性太強,;可以選擇CN,,NH2,或硅膠柱,,HILIC(親水色譜),,也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較精密,,否 則很難重復實驗,,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)   

3. 若樣品是堿性的,;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),,且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術或堿去活技術等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,,因為這樣可增加堿性樣品的保留   

4.如果堿性化合物的極性太強,或堿性太強,;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點是方法開發(fā)簡單,,缺點是目前實 現(xiàn)這一技術的色譜柱品牌比較少,價格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,,這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱(缺點 是不能用來分析其它樣品,,對流動相pH要求比較精密,,否則很難重復實驗)也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。

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