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氨基柱的使用
閱讀：2915 發(fā)布時(shí)間：2017-2-281.氨基柱既可以正相使用,，也可以反相使用，但是要注意到的是：正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的,，正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中,，例如LUNA 氨基柱保存在正己烷-乙腈（99：1）中。
2. 正相使用
2.1 新柱子可直接用流動(dòng)相,。推薦先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積,，再根據(jù)流動(dòng)相選用極性相近的二氯甲烷以相同的流速?zèng)_10倍柱體積，zui后換成流動(dòng)相,。
2.2 正相使用時(shí),，不宜分析含醛基、羰基的化合物,，不可用于還原糖的分析,；流動(dòng)相要*脫氣,，并不得含有羰基化合物和過(guò)氧化物（質(zhì)量不好的四氫呋喃含有少量）。
2.3 任何時(shí)候更換流動(dòng)相時(shí)都要確保新流動(dòng)相與柱子原保存液可互溶,。
3 反相使用
3.1 先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積,，再依次以相同的流速相同的用量用異丙醇、甲醇,、甲醇-水（50：50）沖柱子,。
3.2 以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的（LUNA）水溶液沖柱子（注意pH值切不可超過(guò)11.0），立即用水（0.5ml/min的流速,，30倍柱體積）沖洗,，再換成流動(dòng)相。
3.3 配制流動(dòng)相時(shí),，應(yīng)各組分分別量取,，比例較小的組分要精密量取，需調(diào)pH值時(shí)要精密到0.1,。
3.4 反相條件下使用時(shí),，要特別注意控制pH值范圍，pH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn),，流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn),。的pH范圍在pH 3.0-7.0
3.5 如果要使用的流動(dòng)相中還含有緩沖鹽類，建議在用分析流動(dòng)相之前,，先用不含緩沖鹽的同比例流動(dòng)相過(guò)渡,，這樣可避免緩沖鹽在分析柱內(nèi)的析出。
3.6 有一種情況是,，當(dāng)使用氨基柱進(jìn)行酸性物質(zhì)的分析時(shí),，酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在，可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化,，導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降,。建議：用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0％NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱（沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨）,，之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如0.1％,。
4 色譜柱的沖洗：簡(jiǎn)單說(shuō)起來(lái)，正相條件下使用的氨基柱就參照硅膠柱的清洗方法,；反相條件下使用的氨基柱就參照C18的清洗方法,。
5 色譜柱的保存
5.1 正相使用時(shí)，將柱子沖洗干凈后,，用正己烷-乙腈（99：1）保存,。
5.2 反相使用時(shí)，如短期不用,，可用甲醇或乙腈保存,；長(zhǎng)期不用時(shí)需將甲醇依次用異丙醇置換,，zui后用正己烷保存。
6 色譜柱的再生
6.1 方案1：依次用甲醇,、異丙醇,、正己烷、異丙醇,、甲醇沖柱子（各以0.5ml/min的流速,，20倍柱體積），再換流動(dòng)相,。這些清洗方法,，主要是針對(duì)當(dāng)樣品中有雜質(zhì)逐步吸附累積到填料上時(shí)的處理方法，色譜柱表現(xiàn)行為為諸如柱壓增高柱效降低等,。
6.2 方案2：NH2柱用于反相條件時(shí),，NH2鍵會(huì)水解，尤其是在該柱子pH范圍以外,，在酸性和堿性條件下柱壽命會(huì)下降很快,，如果在這個(gè)條件下使用需要清洗一下，需要用10倍柱體積溶液沖洗,，如下：
95％水/5％乙腈
THF四氫呋喃
95％乙腈/5％水
并保持95％乙腈/5％水繼續(xù)沖洗,，以低流速0.2-0.5mL/min沖洗。
6.3 方案3：柱子使用一定時(shí)間后,，柱效下降,，老化，也可清洗一下柱子恢復(fù)柱性能,清洗時(shí)依次用10倍柱體積的下列溶液沖洗：
95％水/5％乙腈
THF四氫呋喃
95％乙腈/5％水
再走流動(dòng)相即可