日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊

當前位置:
杭州亞萊博儀器有限公司>技術(shù)文章>液相使用中的常見錯誤

技術(shù)文章

液相使用中的常見錯誤

閱讀:3623          發(fā)布時間:2017-2-20

由于沒有考慮到使用一些可以替代的辦法,目前還有傳統(tǒng)做法仍然存在于HPLC的技術(shù)應(yīng)用中,,而這些做法其實非常不利于HPLC技術(shù)的效率提高,、運行成本的降低以及運行時間的縮短。本文中將提出一些可行的傳統(tǒng)做法的替代方法,,有些人可能會對這些替代方法出現(xiàn)爭議,,但如果應(yīng)用得當?shù)脑挘@些替代方法勢必會產(chǎn)生顯著的效果,。因為相比不停地機械勞作,,分析科學(xué)家應(yīng)該更聰明地工作。

 

常見錯誤之一——色譜柱用粒徑5µm的顆粒填充

回想一下,,多年來標準HPLC分析柱(250mm×4.6mm)都是采用5µm 粒徑顆粒填裝的,,然而,事實上3µm 粒徑顆粒填裝的色譜柱(150mm×4.6mm)具有更好的分離效果及更短的分析時間,。同時,,現(xiàn)在許多實驗室標配的色譜儀是超高壓液相色譜(UHPLC)和液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS),所以色譜柱更應(yīng)該換成3µm 或2µm 填裝的色譜柱,。

值得注意的是:3µm 粒徑顆粒填裝的色譜柱進口孔隙更小,,更容易被“臟”的樣品堵塞。

常見錯誤之二——使用4.6mm內(nèi)徑色譜柱(1mL/min)

自20世紀70年代初,,HPLC分析柱的“標準”內(nèi)徑就已經(jīng)是4.6mm了,,而近年來,在努力減少溶劑消耗,、節(jié)約樣品的目標下,,許多實驗室已經(jīng)開始將3.0mm內(nèi)徑的色譜柱作為更好的選擇,來代替使用4.6mm內(nèi)徑色譜柱了,。如果使用現(xiàn)代的中間分散HPLC的話,,柱率和柱外頻帶展寬的效果通常不會受到任何負面影響??傊?,使用較小內(nèi)徑的色譜柱是有利的,在梯度洗脫條件下可以獲得更高的分辨率。

常見錯誤之三——對HPLC的流動相進行過濾

通常經(jīng)凈化系統(tǒng)所得的HPLC級溶劑和水已經(jīng)足夠干凈了,,如果我們再給它一次額外的過濾,,那只會適得其反,引入不必要的化學(xué)污染,。事實上,,許多實驗室都有自己的一套色譜儀器保養(yǎng)維修計劃,每年對HPLC系統(tǒng)中的過濾器進行更換,,所以我們沒有必要再對流動相進一步過濾,。

例外的是:如果你使用的是離子對試劑、低純度緩沖劑或高鹽含量的流動相時,,仍然強烈建議你對流動相進行過濾,。

還有一種情況是有必要進行額外過濾的,,即如果由于水源的質(zhì)量不好或者其他原因?qū)е聫膬艋到y(tǒng)流出的水不夠干凈的時候,。

常見錯誤之四——使用緩沖劑流動相

當分析酸性或者堿性分析物的時候,有必要對流動相進行酸化或者堿化,。簡單的流動相如含0.1%(體積比)甲酸的水溶液,,僅需要將1mL甲酸定容到1升水中即可迅速制備。同樣,,含0.1%(體積比)氨的水溶液可以用于多種高pH值兼容柱,。當使用低硅羥基活性柱時,無論用低還是高pH值流動相運行,,緩沖劑其實都很少用到,,包括以流動相A為稀釋劑配制進樣樣品溶液時。

例外的是:當分析復(fù)雜分子,、復(fù)雜混合物時,,可能仍然需要用緩沖劑流動相,以保持高的選擇性和特別適中的pH值的流動相,。

常見錯誤之五——每次試驗都重新配制新的參考標準溶液

在藥品的質(zhì)量控制實驗室中,,往往每個試驗都會重新配制新的參考標準溶液,實際上這是沒有必要的,。許多藥物在低溫和適當?shù)馁A存條件下溶液具有足夠的穩(wěn)定性,。所以你可以一次性配制幾百個合格的參考標準溶液置于HPLC小瓶中,然后冷藏或冷凍貯存供以后分析用,。而對于試驗結(jié)果的長期穩(wěn)定性研究來說,,更應(yīng)該采用由同一個原始溶液配制而成的標準溶液。當然,,對于通常的試驗,,標準溶液的儲存條件下的穩(wěn)定性(保質(zhì)期)是應(yīng)該經(jīng)過驗證的,并記錄配制時間。這里值得我們注意的是:所有的操作都需要做好記錄,。

常見錯誤之六——對樣品瓶進行搖動

搖動(或反轉(zhuǎn))樣品瓶會在樣品瓶蓋下面形成一層液體膜,,這會對HPLC自動進樣器造成干擾以至于給出一個混亂的試驗結(jié)果。所以即使在排除了故障的情況下,,也要始終警惕這一點,。

例外的是:如果樣品是冷凍過的,那么解凍后,,需要進行渦旋或搖動以確保樣品均勻,。

常見錯誤之七——使用不銹鋼卡套作為柱的接頭

HPLC系統(tǒng)通常安裝有不銹鋼接頭和套圈,大多數(shù)情況下它們工作得都很好,,但是它們不適合用于需要頻繁更換色譜柱時的連接,。

首先,不銹鋼卡套只能與為其量身定制的端部管接頭相匹配,,而對于不同的色譜柱來說這種“量身定制”只會適得其反,。

其次,預(yù)制的不銹鋼接頭只能夠重復(fù)密封5-10次,。當某些制造商的不銹鋼接頭用于其他品牌的色譜柱時,,由于不同端部接頭和插入深度的關(guān)系,這個問題會變得尤其明顯,。

一個可能的解決方案是使用可以用手指擰緊的聚醚醚酮(PEEK)管件,,它們價格低廉,并且在5000psi(34.47MPa)壓力下的密封效果也很好,。許多較新的UHPLC接頭,,其額定壓力為20,000psi(137.9MPa),只需用手指擰緊,,然后用扳手再轉(zhuǎn)四分之一圈就可以了,。

收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功,!我們將在第一時間回復(fù)您~

對比框

產(chǎn)品對比 產(chǎn)品對比 聯(lián)系電話 二維碼 意見反饋 在線交流

掃一掃訪問手機商鋪
0571-87212685
在線留言