厭氧培養(yǎng)箱是一種在無氧環(huán)境下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及操作的裝置,可培養(yǎng)zui難生長(zhǎng)的厭氧升物,又能避免以往厭氧生物在大氣操作時(shí)接觸氧氣而死亡的危險(xiǎn) ,。廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué),、免疫學(xué)、遺傳學(xué),、微生物、農(nóng)業(yè)科學(xué),、藥物學(xué)的研究和生產(chǎn),，已經(jīng)成為上述領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)室常用的儀器。我們?cè)谑褂萌绾握_規(guī)范的操作厭氧培養(yǎng)箱呢,，下面就做簡(jiǎn)單介紹,。
一、操作形成厭氧環(huán)境
1,、調(diào)整混氮?dú)馄?、合氣瓶輸出壓力：調(diào)節(jié)減壓閥，使輸出壓力為0.1Mpa左右,。
2,、接通電源開關(guān)，開控溫儀,，調(diào)節(jié)所需溫度,，操作室里的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制。
3,、按使用要求放置好必要的配件和器具,，并向操作室內(nèi)放入二個(gè)無毒塑料袋。
4,、操作室內(nèi)放入經(jīng)過干燥過1000g鈀粒（封閉）和500g干燥劑,，并放入?yún)捬踔甘緞ǚ忾]）。
5、 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,，并抽真空校驗(yàn),。
6、操作室內(nèi)*次置換（氮?dú)庵脫Q）：
（1）先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口,，另一頭插入塑料袋,。
（2）接通氮?dú)膺M(jìn)氣路，打開氮?dú)饪刂崎y,，使二只塑料袋充足氮?dú)?，然后扎緊袋口。
（3）把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊,。
（4）把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸地放于操作室內(nèi),，至全部放出。
7,、操作室第二次置換（氮?dú)庵脫Q）重復(fù)一次充氮過程,，并注意隨時(shí)開閉排氣閥。 8,、操作室第三次置換（混合氣體置換）：
（混合氣體配比為：N2 90%,；H2 5%；CO2 5%）,。
（1）調(diào)換氣路打開混合氣道通閥門進(jìn)氣,，充氣時(shí)要隨時(shí)開閉排氣閥。
（2）混合氣充滿塑料袋后,，關(guān)掉混合氣直通閥（三通閥）,。
（3）把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。
（4）通過三次換氣后,，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài),。
9、操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,，接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,，一小時(shí)后打開厭氧指示條觀察其變色，變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境,。
10,、開紫外線滅菌燈，室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理,。滅菌時(shí)間自定,。
二、菌種的置入和培養(yǎng)
1,、檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之,。
2,、打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門,。
3,、 取樣室充氮置換三次過程：先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa）以上停，然后人工打開氮?dú)忾y門進(jìn)氣,，使指針回復(fù)零位后進(jìn)行下次操作,。
4、如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù),。
5,、取樣室內(nèi)外門開啟，關(guān)緊要抽低真空度100毫米汞柱（13 Kpa）檢驗(yàn)及幫助操作,。
6,、厭氧培養(yǎng)箱需要長(zhǎng)期連續(xù)使用的條件：
（1）每天在操作室內(nèi)觀察厭氧指示條，正常情況下可繼續(xù)使用,。如不正常就必須重新?lián)Q氣,。
（2）要長(zhǎng)期連續(xù)輸入微量的混合氣體，使補(bǔ)進(jìn)的氫氣能和微量的氧結(jié)合通過催化吸收,，保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài),，補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
（3）連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行一天,，更換一次除氧劑和干燥劑,。
7、接種棒滅菌器的應(yīng)用：
（1）隨時(shí)用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進(jìn)行殺菌（接種棒）,。
（2）熔蠟處可直接放上，試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟,。 |
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