hela-luci，Luciferase穩(wěn)定表達(dá)Hela細(xì)胞

一． 細(xì)胞特性

細(xì)胞名稱：

生長(zhǎng)特性：貼壁 上皮細(xì)胞樣

種  屬：人

貨期（工作日）：5—7

培養(yǎng)難度：★★

 

二． 培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基：90%DMEM(L)+10%FBS

溫度：37℃     氣相：95%空氣,，5%二氧化碳

三． 傳代方式

1.用75%酒精噴灑整個(gè)培養(yǎng)瓶消毒,，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行1-3小時(shí)的緩沖，.然后置于無(wú)菌操作臺(tái),，打開(kāi)瓶口,，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基(以T25培養(yǎng)瓶為例)并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況及培養(yǎng)基顏色變化對(duì)其進(jìn)行換液以及傳代,，一般2到3天換一次液；

2.待細(xì)胞長(zhǎng)滿瓶底面積80%-90%,，需要對(duì)其進(jìn)行傳代,，傳代比例為1:3到1:8；

3傳代步驟：將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°預(yù)熱,，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，往培養(yǎng)瓶中加入3-5 ml PBS，輕晃洗滌后棄去,。往瓶中加1-2 ml預(yù)熱好的胰酶,，置于37°孵育消化（第d一次消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓,、輕拍瓶壁見(jiàn)細(xì)胞脫落為d佳消化時(shí)間,，記錄d佳消化時(shí)間，以便于下次消化）,，消化好后加入3ml*培養(yǎng)基終止消化,。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落,，然后收集細(xì)胞懸液,，1200rpm離心3min，棄上清,，加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，進(jìn)行傳代。

四． 凍存條件

凍存條件：80%*培養(yǎng)基+10%FBS+10%DMSO

(*建議使用本公司無(wú)血清細(xì)胞冷凍液（H-W-100）,，用4度保存的冷凍液重懸細(xì)胞,，直接凍存于-80°C。)

長(zhǎng)期存儲(chǔ)：液氮

五． 供應(yīng)限制

該產(chǎn)品僅供研究使用,。

發(fā)貨方式

我們采取兩種形式的細(xì)胞發(fā)貨方式：

  1. 復(fù)蘇發(fā)貨

                  a. T25瓶活細(xì)胞發(fā)貨

                  b. 血清重懸發(fā)貨

  2. 凍存管發(fā)貨(干冰發(fā)貨)
 對(duì)于采取凍存管方式發(fā)貨的客戶,，為了保證可靠性我們會(huì)多發(fā)一管細(xì)胞(共2管)，干冰覆蓋保溫運(yùn)輸,。

復(fù)蘇及凍存發(fā)貨方式均為順豐速運(yùn),，我們會(huì)根據(jù)收貨地址及溫度差異采取不同的發(fā)貨方式(T25/血清重懸/凍存/用戶),，并在發(fā)貨前的3天內(nèi)與您確認(rèn)收貨地址及配送方式。

歡迎江浙滬地區(qū)的客戶到實(shí)驗(yàn)室上門(mén)自?。▓?bào)銷路費(fèi)）,。

蒂科生物論文基金獎(jiǎng)勵(lì)方法

獎(jiǎng)勵(lì)對(duì)象：

使用HAKATA系列產(chǎn)品(HAKATA全系列：血清、凍存液,、試劑,、細(xì)胞株等)培養(yǎng)細(xì)胞并在中文核心期刊雜志或SCI期刊雜志發(fā)表文章，且文章中材料和方法欄中標(biāo)注我公司品牌名或公司名(英文：HAKATA或Shanghai Chuanqiu Biotechnology Co.,Ltd, China,，中文:HAKATA或蒂科生物)

該獎(jiǎng)勵(lì)方案長(zhǎng)期有效,，歡迎大家與我們分享獲得成果的喜悅！

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