HAKATA 豬血清,，貨號：26250-084   

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HAKATA 豬血清，貨號：26250-084

公司主營業(yè)務(wù)：胎牛血清（HAKATA,、HyClone,、SERANA、NTC,、Corning,、BOVOGEN、PAA,、PAN,、SIGMA），無外泌體血清(SBI),，ELISA試劑盒,，細(xì)胞（800多株通過STR鑒定），代購ATCC原代細(xì)胞,，HAKATA,、HyClone培養(yǎng)基（干粉、液體）,、雙抗,、胰酶，CST,，Abcam,，Sigma等抗體。

1,、如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損   

將血清從冷凍箱取出后,，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融,。但必須注意的是,，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻,。

長時間儲存在2～8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素,、纖維蛋白原,、纖粘蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,，推薦在-20℃以下儲存血清,，并避免反復(fù)凍融,。 建議血清應(yīng)保存在-20℃,。若存放于4℃時，請勿超過一個月,。若一次無法用完一瓶,，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍,。

2,、血清中包含絮狀沉淀，他們是什么,，怎么處理,？

沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,，不會影響產(chǎn)品性質(zhì),。要除去沉淀，離心血清（400g,，1～2分鐘）或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里（一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾）,。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解,。所以，使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃,，沉淀會自然消失.

3,、如何避免血清中產(chǎn)生沉淀？

（1）解凍血清時,，隨時將之搖晃均勻,，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生,。   

（2）血清分裝凍存時,，須規(guī)則搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與成分均一,。   

（3）勿由-20℃直接放置于37℃解凍,，因溫度改變太大,，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。   

（4） 勿將血清置于37℃太久,，否則血清會變得渾濁,，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì),。   

（5） 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,，若非必要，可以無須做此步驟,。   

（6） 若必須做血清的熱滅活,，請遵守56℃，30分鐘的原則,，并且隨時搖晃均勻,。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻,，都會造成沉淀物的增多,。

4,、培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,，可以長期保存嗎,？

一旦在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,，盡量在1個月內(nèi)使用它,。因為一些抗生素和血清中的基本成分可能在解凍后就開始降解,。  

5,、細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎,？如何處理,？   

在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,，然后,，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動,。如果細(xì)胞被污染,，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃,、變混濁,。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等,。

（1）細(xì)胞生長過老,，破碎的細(xì)胞殘骸；

（2）血清質(zhì)量不好,，反復(fù)凍融的結(jié)果,；

（3）配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長,；

（4）配制培養(yǎng)基的水質(zhì),、容器不合格?？蓱?yīng)用離心,、過濾的方法去除這些黑點；

（5）培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點,，可能是原代組織中的雜質(zhì),，多次傳代可以消除。  

 6,、細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點生成,？

（1） 盡可能地減少血清凍融次數(shù)；

（2） 培養(yǎng)基無需37℃水?。?

（3） 培養(yǎng)基保持*PH值7.0~7.2,；

（4） 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),，容器定期刷洗；

（5） 掌握細(xì)胞傳代的*時機,，細(xì)胞切勿生長過老,。

7、 為什么要熱滅活血清?

加熱可以滅活補體系統(tǒng),。激活的補體參與溶解細(xì)胞事件,，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺,，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,。在免疫學(xué) 研究，培養(yǎng)ES細(xì)胞,、平滑肌細(xì)胞時,，推薦使用熱滅活血清。

8,、有必要做熱滅活嗎?

實驗顯示,，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進,，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低,。而經(jīng)過熱處理的血清,，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,，像是“小黑點”,，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中,，又會使此沉淀物更增多,，使研究者誤認(rèn)為是微生物 的分裂擴增。若非必須,，可以不需要做熱處理這一步,。不但節(jié)省時間，更確保血清的質(zhì)量!

1. 小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項?

來源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛,。
    組份與比例不同：兩者所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子,、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,，用途與用法不同：某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長，而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,，使用濃度不同,，一般在5%-10%，有特殊要求的濃度在20%,。

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Ectl/E6E7,，人宮頸細(xì)胞

Endl/E6E7,，人子宮內(nèi)膜細(xì)胞

Vk2/E6E7，人陰道上皮細(xì)胞

HOSEpiC,，人卵巢上皮細(xì)胞

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GEO, 人結(jié)腸癌細(xì)胞

MODE-K ,，小鼠小腸上皮細(xì)胞系

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A549/DDP細(xì)胞，人肺腺癌/順鉑耐藥株

BEL/FU,，人肝癌氟尿嘧啶耐藥株

BIU-87/ADR,，人膀胱癌阿霉素耐藥株

COC1/DDP，人卵巢癌順鉑耐藥株

HCT8/FU,，人結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株

HCT8/V,人結(jié)腸癌長春新堿耐藥株

HCT8/Taxol,人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株

HL-60/Adr,，人白血病阿霉素耐藥株

PATU8988/FU，人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株

SGC7901/DDP,，人胃癌順鉑耐藥株

L1210/DDP,小鼠白血病耐順鉑細(xì)胞株

lovo/Adr,，人結(jié)腸癌耐阿霉素細(xì)胞株

hct116/L，人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株

K562/Adr,，人白血病阿霉素耐藥株

MCF-7/ADR細(xì)胞,，人耐阿霉素乳腺癌細(xì)胞

H1975/培美曲塞，人肺腺癌細(xì)胞培美曲塞耐藥株

H446/VP,，人肺癌依托泊苷耐藥株

BIU-87/ADR,，人膀胱癌阿霉素耐藥株

ECA109/VCR，人食管癌長春新堿耐藥株

MUTZ-5細(xì)胞,，急性淋巴細(xì)胞B細(xì)胞白血病細(xì)胞

MV-4-11細(xì)胞,，急性髓性白血病細(xì)胞

NALM-1細(xì)胞，急變期慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞

NALM-19細(xì)胞,，急性淋巴細(xì)胞B細(xì)胞白血病細(xì)胞

NALM-6細(xì)胞,，急性淋巴細(xì)胞B細(xì)胞白血病細(xì)胞

NAMALWA細(xì)胞，Burkitt淋巴瘤細(xì)胞