HCoEpiC,，人正常結腸上皮細胞,，上海細胞庫    

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★CQ★“細胞空泡化”在細胞培養(yǎng)中也是一個常見問題,，它的出現原因有多種,，實驗人員碰到往往會很頭疼。

在文章中小編給大家列舉出了可能出現這種情況的原因,，方便大家進行分析選擇解決的方法,。

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★CQ★可以引起細胞空泡化出現的原因有哪些那,？

1）細胞老化

原代細胞培養(yǎng)的過程中經常出現這樣的情況，是有些細胞處于終末分化狀態(tài),，不會再分裂,，時間長了就會空泡化而死亡。

傳代細胞出現這種狀況比較少見,，出現的原因一般都是因為細胞傳代次數過多,，老化嚴重。

2）PH值

培養(yǎng)液的PH值與細胞正常所需PH值差別太大,。

3）胰酶消化

 胰酶消化時間過長,，會導致細胞狀態(tài)受損，有時也會出現這種情況,。除此之外,，還有一個大家容易忽略的問題,在香港的一家科研機構表明如果消化細胞吹打時力度過大，產生太多氣泡,，長期存在也會出現這種現象,。

4）自噬

細胞缺乏營養(yǎng)導致饑餓誘導形成自噬也會形成空泡化,，但是這種空泡在光學顯微鏡下是看不到的,，只有在電鏡下才能觀察到。

5）細胞代謝

在細胞培養(yǎng)過程中,，由于血清濃度不夠,、藥物作用、外界刺激等情況下導致細胞代謝出現問題,，內質網應激狀況下會出現細胞空泡化的情況,。

6）污染

衣原體感染：一旦一些細胞出現空泡化，繼續(xù)培養(yǎng),，空泡范圍會擴大,，即使傳代后也如此，出現這種情況,，細胞基本無法挽救,。后來檢測發(fā)現,，此種細胞存在衣原體的感染。

★CQ★支原體污染：支原體污染在不嚴重的時候細胞是沒有什么明顯癥狀的,，而且也無法通過光學顯微鏡觀察到,，只有在嚴重的時候會導致細胞狀態(tài)變差，出現細胞空泡化的現象,，細胞膜上也會出現小黑點附著,。

★CQ★病毒污染：在文獻上也有說病毒污染也會導致細胞出現空泡化的情況。

遇到細胞空泡化我們應該如何解決,？

1）如果是因為細胞老化的原因,，可以通過復蘇代數靠前的細胞進行培養(yǎng)。

2）如果是培養(yǎng)液PH的問題,，可以通過更換培養(yǎng)液調整到合適的PH值,，再進行培養(yǎng)。

3）在傳代時,，要選用合適濃度的胰酶和選取適當的消化時間進行消化,，在操作時避免吹打太過用力出現太多氣泡。

4）要保證細胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)充足,，可以通過增加血清濃度和在培養(yǎng)基中加入谷氨酰氨解決,。

5）盡量使用質量好和渠道正規(guī)的胎牛血清，因為這樣的血清營養(yǎng)豐富且外源刺激因子少,，可以有效的避免出現這類問題,。

6）在細胞培養(yǎng)時要嚴格進行無菌操作，操作時要規(guī)范,，減少污染的可能性,。可以通過試劑盒檢測細胞是否污染,，對于已經污染的細胞滅菌后直接處理,，避免污染其他細胞。

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