Sigma凍存液 二甲基亞砜 DMSO D2650   

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  血清,，指血液凝固后,，在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),、提供激素和各種生長(zhǎng)因子,、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷,、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用,。

一、全血,、血漿和血清有什么區(qū)別 

  血液經(jīng)抗凝處理后的全部血液為全血,；離心除去血細(xì)胞后所得到的淡黃色液體為血漿。如血液不經(jīng)抗凝處理,，讓他自行凝固,，則在抽血后的一段時(shí)間內(nèi)，血液會(huì)自動(dòng)在一系列凝血因子的作用下發(fā)生凝集,，血液首先凝固成一個(gè)整體,，再經(jīng)過(guò)一段時(shí)間或用離心機(jī)離心，血液中凝固的部分會(huì)與一些清澈淡黃色的液體分離開(kāi),，這些液體稱為血清。血清與血漿從表面上看似乎沒(méi)有什么不同,，但其內(nèi)在的主要區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原,，是未經(jīng)抗凝處理過(guò)的血液凝固后得到的。 抽血做化驗(yàn)中常遇到某些化驗(yàn)要求用血清測(cè)定,、用全血測(cè)定,、用血漿測(cè)定，即是指血液標(biāo)本的三種主要處理方式和要求,。用途不同：血清多用于血液生化,、免疫等方面的測(cè)定,；血漿多用于凝血等方面的測(cè)定；全血?jiǎng)t多用在血細(xì)胞,、血常規(guī),、血沉等方面的測(cè)定。

二,、血清分類

  胎牛血清,、透析型胎牛血清、超低IgG胎牛血清,、干細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清 ,、活性炭/葡萄糖處理胎牛血清、熱滅活胎牛血清,、小牛血清,、新生牛血清、補(bǔ)鐵小牛血清,、成牛血清,、馬血清、兔血清,、雞血清,、豬血清、馬血清,、無(wú)外泌體血清,、人血清、人AB血清,、其他動(dòng)物血清,。

三、主要成分

  血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,，其組成成份雖大部分已知,，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e,、年齡,、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度,、酸堿度,、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學(xué)成分組成,，這些化學(xué)成分包括白蛋白,、α1、α2、β,、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶等,。血清中含有各種血漿蛋白、多肽,、脂肪,、碳水化合物、生長(zhǎng)因子,、激素,、無(wú)機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的,。

  對(duì)血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展,，但仍存在一些問(wèn)題。主要是：

*:血清的成份可能有幾百種之多,，對(duì)其準(zhǔn)確的成份,、含量及其作用機(jī)制仍不清楚，尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子,、激素和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí),，這給研究工作帶來(lái)許多困難；

第二:血清都是批量生產(chǎn),，各批量之間差異很大,，而且血清保存期至多一年，因此,，要保證每批血清的相似性極為困難,，從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制；

第三:不能排除血清中含有易變物質(zhì),，這被認(rèn)為是“瓶中惡化”的原因之一,。

四、主要作用

  提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸,、維生素,、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì),、核酸衍生物等,，是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。

  提供激素和各種生長(zhǎng)因子：胰島素,、腎上腺皮質(zhì)激素（地塞米松等）,、類固醇激素（雌二醇、睪酮,、孕酮）等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子,、血小板生長(zhǎng)因子等,。

  提供結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì)，如白蛋白攜帶維生素,、脂肪,、以及激素等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵,。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用,。

  提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。

  對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用：有一些細(xì)胞,，如內(nèi)皮細(xì)胞,、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分,，起到中和作用,。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的，則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用,。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代,。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,，特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),，粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,，他們?cè)诖x解毒中起重要作用,，如SeO3,硒等。

五,、保存方法

  血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,。然而，若存放于4℃時(shí),，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月,。若您一次無(wú)法用完一瓶，建議將無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),，再放回冷凍,。

a、如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損,？

  將血清從冷凍箱取出后,，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶,。但必須注意的是,，溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

b、避免產(chǎn)生沉淀物

1,、解凍血清時(shí),，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃,，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。

2、解凍血清時(shí),，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生

3,、請(qǐng)勿將血清置于37℃太久,。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁,，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,，而影響血清的質(zhì)量。

4,、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,，若非必要，可以無(wú)須做此步驟,。

5,、若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃,，30分鐘的原則,，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,，都會(huì)造成沉淀物的增多。 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),，該如何處理?　欲去除這些絮狀沉淀物,，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心,，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾,。但不建議以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜,。

c,、何謂熱滅活

  一般是以56℃，30分鐘來(lái)處理已解凍的血清,，因?yàn)榇思訜岵襟E,，可以使補(bǔ)體去活化,，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮,，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。

d,、有必要做熱滅活嗎

  實(shí)驗(yàn)顯示,，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),，或*沒(méi)有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低,。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,，這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,，像是 "小黑點(diǎn)"，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,，而把血清放在37℃環(huán)境中,，又會(huì)使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增,。購(gòu)買的時(shí)候注意詢問(wèn)廠家是否是已滅活血清,。

e、保存注意事項(xiàng)

（1）需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃至- 70℃ 低溫冰箱中,。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月,。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选?/span>

（2）熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已*解凍的血清,。加熱過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻,。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分滅活。除非必須,，一般不建議作此熱處理,，因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多，而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量,。補(bǔ)體參與反應(yīng)有：細(xì)胞毒作用,，平滑肌細(xì)胞收縮，肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺,，增強(qiáng)吞噬作用,，促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化,。

（3）瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,，待全部溶解后再分裝,。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與成分均一,，減少沉淀的發(fā)生,。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍，這樣因溫度改變太大,，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,。

（4）一般廠商提供的血清為無(wú)菌，無(wú)需再過(guò)濾除菌,。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,，切勿直接過(guò)濾血清。

（5）血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量,?？捎秒x心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理。 顯微鏡下“小黑點(diǎn)”:經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著增多,。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染,。一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，但如果懷疑血清質(zhì)量,，則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號(hào)的血清,。

（6）切勿將血清在37℃放置太久，否則血清會(huì)變得渾濁,，同時(shí)血清中的有效成分會(huì)破壞而影響血清質(zhì)量,。

胎牛血清與新生牛血清價(jià)格差別很大。除了生產(chǎn)成本和供應(yīng)來(lái)源不一樣外,，兩種血清的成分也很不相同,。胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時(shí)，將胎牛取出并進(jìn)行心臟穿刺取血,。穿刺取血可zui大程度的避免外界的污染,。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈采血。和新生牛血清相比,，胎牛血清顯然產(chǎn)量低,，成本高。

  二者的成分也很不一樣,。和新生牛血清相比,，胎牛血清除了免疫球蛋白含量很低之外，還含有豐富的胚胎生長(zhǎng)促進(jìn)因子以及各種還未*鑒定的成分,，可滿足所培養(yǎng)細(xì)胞的特殊的代謝需求,。

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