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HAKATA10099-133胎牛血清HAKATA10099-141胎牛血清
細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成
(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù),。
(2) 培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴。
(3) 培養(yǎng)基保持*PH值7.0- 7.2,。
(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),,容器定期刷洗,。
(5) 掌握細(xì)胞傳代的*時(shí)機(jī),,細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過老,。
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小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)?
來(lái)源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛,。
組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子,、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),,而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,,一般在5%-10%,,有特殊要求的濃度在20%。
血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,,若存放在4℃不可超過一個(gè)月,。解凍血清時(shí) ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,,并經(jīng)常搖勻使之溶解,,然后至室溫放置使之升溫,,不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,,如放在37℃解凍,,顏色加深,粘稠度也會(huì)增加,,血清在解凍和熱滅活后,,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融,。
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e,、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異,。血清中含有各種血漿蛋白,、多肽、脂肪,、碳水化合物,、生長(zhǎng)因子、激素,、無(wú)機(jī)物等,,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。
胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛,;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛,;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
顯然,,胎牛血清是品質(zhì)zui高的,,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體,、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分zui少,。
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),,具有極為重要的功能。
1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
2. 提供結(jié)合蛋白,,能識(shí)別維生素,、脂類、金屬和其他激素等,,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力,。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,,起到解毒作用。
4.是細(xì)胞貼壁,、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源,。
5.起酸堿度緩沖液作用。
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