豬口蹄抗原ELISA試劑盒
1. 血清標(biāo)本收集,、處理、保存方法:
用無熱原,、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,,全血標(biāo)本室溫放置1-2 h或4℃隔夜,然后4℃,、3000 rpm/min離心20 min,,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),,避免反復(fù)凍融,。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
2. 血漿標(biāo)本收集,、處理,、保存方法:
根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素na或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的采血guan或離心管采集血液標(biāo)本,,室溫混合20 min左右,,然后4℃,、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清即為血漿,。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),,避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本,。
3. 尿液標(biāo)本收集,、處理、保存方法:
用干凈容器收集尿液,,4℃,、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清,。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),,避免反復(fù)凍融。
4. 唾液標(biāo)本收集,、處理,、保存方法:
用干凈離心管收集唾液,4℃,、3000 rpm/min離心20 min,,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),,避免反復(fù)凍融,。
5. 細(xì)胞標(biāo)本收集、處理,、保存方法:
(1)細(xì)胞培養(yǎng)上清
取細(xì)胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中,,4℃、3000 rpm/min離心20 min,,小心收集上清,。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融,。
(2)細(xì)胞裂解液
收集細(xì)胞培養(yǎng)液,,4℃、3000 rpm/min離心20 min,,棄去上清,,用預(yù)冷的PBS(0.01M,PH 7.4)洗滌三次,。加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞,。通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞充分裂解。然后4℃,、10000 rpm/min離心20 min,,除去細(xì)胞碎片,取上清,。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),,避免反復(fù)凍融。
6. 植物標(biāo)本收集,、處理,、保存方法:
取適量大小組織塊(一般0.2-0.5 g),,用預(yù)冷的PBS緩沖液(0.01M,,PH 7.4)漂洗三次,濾紙拭干水分,。準(zhǔn)確稱重,,放入勻漿管中,加入4倍體積的勻漿介質(zhì)(0.05 mol/L Tris-HCl,,pH 7.4 PBS緩沖液)于勻漿管中,,冰水浴條件下,剪碎組織塊,,手工勻漿或機(jī)器勻漿,,制成勻漿液。4℃,、10000 rpm/min離心20 min,,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),,避免反復(fù)凍融,。
7. 糞便標(biāo)本收集、處理,、保存方法:
采集時(shí)用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中,,向離心管中加入適量PBS緩沖液(0.01M,PH 7.4),,攪拌均勻,。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min,,小心收集上清,。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融,。
8. 組織標(biāo)本收集,、處理、保存方法:
將組織樣本用PBS緩沖液(0.01M,,PH 7.4)沖洗,,洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì),。將組織塊稱重,記錄后剪碎(碎塊盡量?。?。將組織按一定的比例(通常組織重量:PBS體積=1:9)加入預(yù)冷的PBS緩沖液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)中勻漿,勻漿時(shí)置于冰上,。吸取勻漿液到離心管中,,4℃、10000 rpm/min離心20 min,,小心收集上清,。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融,。
豬口蹄抗原ELISA試劑盒
1.ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。
4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,,計(jì)算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
6.底物請避光保存。
1. 靈敏度:有二層含義,,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力,;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。2. 特異性:常用交叉反應(yīng)率表示,。其越高說明特異性越好,。
3. 精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時(shí)考察線性范圍
4. 穩(wěn)定性:試劑在規(guī)定條件下能儲存的時(shí)間,,一般采用破壞性試驗(yàn)即將試劑存放于37℃保存,,定期測定其靈敏度,特異性和精密度等指標(biāo),,直到其質(zhì)量指標(biāo)開始下降為止,,通常認(rèn)為37℃每穩(wěn)定一天相當(dāng)于4-10℃保存一個(gè)半月。
5. 簡便性:指在不影響試劑的前三項(xiàng)指標(biāo)的前題下,,實(shí)驗(yàn)和測定步驟越少越好,,在定性試驗(yàn)中結(jié)果判斷簡單明了,定量試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算也應(yīng)簡單,。
6. 安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性,。
7. 經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本而市場價(jià)格比較合理。
試劑評價(jià):需要有的確證方法確證的樣品進(jìn)行檢測,,一般實(shí)驗(yàn)室不易取得此類樣品,,每新購進(jìn)一次試劑評價(jià)也很麻煩,??梢酝ㄟ^間接的回收實(shí)驗(yàn)對試劑進(jìn)行選擇
溫馨提示:本產(chǎn)品僅供研究,不用于診斷或治療,;