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HAKATA胎牛血清暑期*

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內(nèi)毒素檢測

內(nèi)毒素,，又叫脂多糖（LPS）或脂寡糖（LOS）,，存在于革蘭氏陰性菌的細胞外膜。臨床上,，內(nèi)毒素作為一些革蘭氏陰性菌的診斷提示,，如腦膜炎球菌。動物體內(nèi)，內(nèi)毒素能夠?qū)е掳l(fā)熱或者誘導(dǎo)炎癥反應(yīng),；細胞培養(yǎng)中,，內(nèi)毒素能夠誘導(dǎo)細胞反應(yīng)異常。

通常,，采用鱟阿米巴樣細胞裂解實驗（LAL檢測）檢測內(nèi)毒素水平,。LAL是從美洲鱟（見圖一）的血液中制備的，對內(nèi)毒素非常靈敏,，在微量內(nèi)毒素存在情況下就凝結(jié),。阿米巴樣細胞相當(dāng)于哺乳動物的白細胞。

特異性血清及其加工方式

熱鈍化

胎牛血清的常規(guī)處理方式是熱鈍化,，即放在56°水浴30分鐘,；其目的是使血清中的補體成分及一些未知的細胞生長抑制分子失活。

與胎牛血清的其它加工方式一樣,，熱鈍化處理過程必須小心謹(jǐn)慎,，因為血清中的生長因子容易在較高溫度或者較長時間加熱條件下失活，甚至產(chǎn)生沉淀,。

Life Technologies公司的Invitrogen及HAKATA品牌的熱鈍化胎牛血清用在細胞培養(yǎng)中,，來研究UCP-2及UCP-3 [3] ，核因子kappa-B [4] ,，蠶桿狀病毒表達系統(tǒng)中表達FMDV衣殼蛋白 [5] ,，亞臨床的移植物抗宿主病 [6] ，IFN-gamma的作用 [7] ,，及自噬 [8] 。Thermo Fisher HyClone公司的熱鈍化胎牛血清用來研究能引起嚴(yán)重急性呼吸綜合征的冠狀病毒的核衣殼蛋白 [9] ,，NO [10] ,，激活素C [11] ，及IE1 [12] ,。Sigma公司的熱鈍化胎牛血清用來研究化療 [13] ,，而Equitech-Bio公司的熱鈍化胎牛血清用來研究谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶Pi [14] 。

活性炭處理

活性炭能夠結(jié)合脂溶性分子,，因此能夠用來除去激素類物質(zhì),，例如，胎牛血清中的雌二醇,、孕酮,、皮質(zhì)醇、睪酮及T3和T4分子,。血清中這些脂類激素能夠干擾免疫檢測及胰島素檢測方法,。

Thermo Scientific的活性炭吸附的胎牛血清（csFCS）被用來識別TGF-beta家族成員 [15] 。

透析處理

透析處理能夠除去胎牛血清中所有分子量小于10,000Da的分子,。例如,，激素,、細胞因子、葡萄糖,、氨基酸還有許多其它分子,，都能夠被除去。透析也能除去胎牛血清中的抗生素及其它內(nèi)源分子,。

Life Technologies的透析處理的胎牛血清被用來研究驅(qū)動蛋白5B [16] 及丙酮酸激酶M2失活 [17] ,，Thermo Fisher HyClone的透析處理胎牛血清用來研究KRAS信號通路的突變 [18] ，而Sigma公司的透析處理胎牛血清用來研究PAH代謝情況 [19] ,。

gamma照射

Gamma照射能夠?qū)μヅＱ暹M行滅菌處理,。胎牛血清常規(guī)的滅菌方法是多次透過0.1um的濾膜以消除微生物污染，而gamma照射能夠鈍化牛群中常見的病毒,。但是,，一些類型的病毒能夠抵抗gamma照射，比如細小病毒,。

低IgG含量

低IgG的胎牛血清適用于抗體生產(chǎn)及相關(guān)領(lǐng)域,。

圖 2. HAKATA Life Technologies許可。

干細胞培養(yǎng)

與一般細胞培養(yǎng)相比,，干細胞培養(yǎng)對生長因子有更嚴(yán)格的要求,。由于胎牛血清中的一些生長因子促進干細胞分化，所以,，需要檢測各批胎牛血清在保持不同類型干細胞的性方面的性能,。

來源地

胎牛血清的主要來源地就是那些大量養(yǎng)牛的國家，包括美國,、澳大利亞,、新西蘭、加拿大及南美和中美洲地區(qū),，由政府機構(gòu)管理血清制品的生產(chǎn)及收集過程,。

胎牛血清分為美國農(nóng)業(yè)部（USDA）級和歐盟級。其中,，美國農(nóng)業(yè)部級胎牛血清沒有瘋牛?。˙SE）及口蹄疫（FMD）污染，能夠出口到任何國家,，而歐盟級胎牛血清只在大部分歐洲國家及亞洲國家銷售,。

如何保存胎牛血清？

胎牛血清一般是在-5°到-20°之間凍存,，2°到8°之間融化,。一個比較好的辦法是，將胎牛血清分裝到50ml管中，這樣做就避免了反復(fù)凍融對血清造成的危害,。血清融化后常出現(xiàn)沉淀,，可能是血清蛋白變性造成的。簡短離心即可除去沉淀,，并且,，這些沉淀一般不會影響血清質(zhì)量的。

胎牛血清的選擇

許多供應(yīng)商提供不同等級,、不同來源及不同處理的胎牛血清,。而胎牛血清是一種復(fù)雜的混合物，不同供應(yīng)商的不同批次產(chǎn)品肯定會有一些不同,。因此,，有必要建立一套選擇、評估胎牛血清的機制,。

一般來說,，可以通過參考相關(guān)研究文獻選擇適合的胎牛血清。

Labome對212篇科研文獻做了關(guān)于胎牛血清使用情況的調(diào)查,。