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| 編號(hào)：MXC027 細(xì)胞株名稱：A549/Taxol人肺癌紫杉醇耐藥株 種屬：人 組織來源：肺癌 生長特性：貼壁生長 形態(tài)特征：上皮細(xì)胞 微生物及支原體檢測(cè)：陰性 安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù),，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。 | ||
| 培養(yǎng)條件： | *培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%胎牛血清+200ng/ml Taxol 血清我們推薦用: HAKATAFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03,。 培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5% | |
| 傳代方法： | 收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況,。 （一）如果細(xì)胞未長滿,，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作,，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng),。 (二)如果細(xì)胞已長滿,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下： 1. 棄去培養(yǎng)液,，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次,。 2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒,，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。 3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出一半,，分到新的培養(yǎng)瓶中,。如果沒有特別說明，收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二,。 注：觀察細(xì)胞在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行,，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下,。 2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基,，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素,。 3、有些細(xì)胞貼壁不牢,，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。 4,、收到細(xì)胞后,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,，請(qǐng)及時(shí)與我們,。.. | |
| 凍存方法： | 凍存液：90%胎牛血清，10%DMSO 儲(chǔ)存：液氮儲(chǔ)存 | |
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