EB2細(xì)胞,，EBC-1細(xì)胞怎想算是消化好

不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,，只要能移動(dòng)了,，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成*分離細(xì)胞,，這是沒(méi)有必要的,。一般能移動(dòng)了，說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,，間隙很大，才停止,。細(xì)胞就是*成單個(gè)細(xì)胞懸液,，之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,，無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試,，準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起,。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,，容易聚集，不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑,，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái),，這個(gè)時(shí)候即使是成片的（比如Calu-3細(xì)胞），吹打不超過(guò)20次后（一般10次即可）,，成小規(guī)模聚集（10個(gè)細(xì)胞左右）,，是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,，或者象有的同學(xué)那樣吹打1h,，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。