細胞細胞培養(yǎng)面面觀

具體步驟：

1.將水浴鍋預(yù)熱至40℃

2.用75％酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面,。

3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管,、培養(yǎng)瓶等等,。

4.根據(jù)細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。

5.從液氮罐中取出細胞盒,，取出所需的細胞,，同時核對管外的編號。

6.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,，并要不斷的搖動,，使管中的液體迅速融化。

7.約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,，

8.平衡后，放入離心機中3000r/min 離心3min

9.吸棄上清液,。

10.向凍存管內(nèi)加入1ml培養(yǎng)液,，吹打制成細胞懸液。

zui后將細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),，將培養(yǎng)瓶放入37℃和5％CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)12-24小時后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),，換液的時間由細胞情況而定,。
 

注意事項：

1>復(fù)蘇時選用的培養(yǎng)基要符合凍存管上標明的培養(yǎng)基。2>操作人員應(yīng)戴防護面罩及手套,，防止冷凍管可能爆裂之傷害,。3>自液氮或干冰容器中取出冷凍管，檢查蓋子是否旋緊,，由于熱脹冷縮過程,，此時蓋子易松掉。