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市場上的胎牛血清種類繁多,,魚龍混雜,,很多科研工作者,,特別是剛接觸細胞培養(yǎng)的人,,難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣,。蒂科(上海)生物科技有限公司為您總結(jié)如下:
一、外觀
拿到血清,,zui先接觸的是血清外觀,,對于缺少細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人來說,外觀的判斷尤為重要,。
1,、顏色
根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,,我國的細胞培養(yǎng)用血清標準是不高于20mg/dl,,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,,這個指標的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴謹規(guī)范程度,,良好的操作能降低血清的溶血。
國產(chǎn)血清的采血點很分散,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,,所以很少會有溶血,,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色,當然,,國產(chǎn)血清也很少有標準意義上的胎牛血清,。
進口胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,,紅細胞容易破裂,。
總的來說,國產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃,。進口的血清,,質(zhì)量的呈現(xiàn)出談黃、微紅色,,差點的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色,。當然,,熱滅活血清或保存不當?shù)难?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅,,甚至咖啡色,。
2、沉淀
很多血清客戶,,會發(fā)現(xiàn)進口血清有沉淀,,從而懷疑血清的質(zhì)量問題,這是沒有根據(jù)的,。
血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,,對血清質(zhì)量沒有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān),。
國產(chǎn)的血清,大多來自北方,,由于價格低廉,,保存環(huán)境都不好,從采血,、冷凍,、運輸?shù)缴a(chǎn)會經(jīng)過多次凍融,每次凍融過程,,就會析出部分纖維蛋白沉淀,,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈",很少有沉淀產(chǎn)生,。
進口的胎牛血清,,過濾分裝前很少會反復(fù)凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的,,但隨著時間的推移,,血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀。當然,,進口的新生牛血清,,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,,生產(chǎn)后血清可能會渾濁,,甚至有大量沉淀。
當然,,購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),,使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進行,,否則沉淀相對較多,,雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙,。
3,、澄清度
進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄,、清淡,,而國產(chǎn)血清,因為絕大多數(shù)是新生牛血清,,相對而言更加粘稠,,顏色略深,這對于初步接觸血清的人很難判斷,,但把兩者進行對比,,可容易分辨。
二,、主要技術(shù)指標
目前國內(nèi)血清的質(zhì)量標準是2005版的《中華人民共和國藥典》,,主要指標有以下幾點:
1、內(nèi)毒素
標準為不高于5EU/ml,。內(nèi)毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,,因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。目前,,國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求,,很多進口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而更高,,如HAKATA 26140,只要求不高于50EU/ml,,高出我國標準10倍,,即使是16000,也要10EU/ml,,血清質(zhì)量也未見影響,。可見,,內(nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量,,除非含量*,預(yù)示著已經(jīng)污染,。
2,、總蛋白含量
胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,,說明采血的牛齡偏大,,不是胎牛,數(shù)值偏低,,表明血清可能摻水了,。
3、血紅蛋白
標準為不高于20mg/dl,,顏色越紅,,數(shù)值越高,,反之,,數(shù)值越低。
4,、pH值
國產(chǎn)血清,,大多高于7.5,進口胎牛血清,,大多低于7.5,,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),,這也能用來初步鑒別血清的來源,。
5、微生物
包括細菌,、霉菌,、支原體、噬菌體,、各類病原性病毒等,。隨著國內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型"微生物幾乎能100%控制,,支原體經(jīng)過0.1um過濾,,大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,,主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入,,又無法過濾,很難*清除,,但對血清質(zhì)量影響不大,。病原性病毒,特別是BVDV,,在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,,這類微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進口胎牛血清中基本都控制的很好,。
6,、免疫球蛋白
國產(chǎn)血清的只是定性檢測,結(jié)果也很不準確,,進口胎牛血清大多定量檢測,。免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血的時的牛齡情況,國產(chǎn)血清,,基本都是新生牛的,,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,,進口胎牛血清,,不含IgM,IgG的含量也較低,。
7,、其它
不管是國產(chǎn)還是進口血清,都是不測抗生素的(無四環(huán)素胎牛血清除外),。國外,,抗生素的使用很嚴格,用量也很少,,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內(nèi),抗生素的濫用已成了普遍現(xiàn)象,,血清中殘留很高,,對細胞培養(yǎng)極為不利,這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因,。
三,、血源
市場上的血清血源主要分為中國,、北美、南美和澳洲,。
1,、國產(chǎn)血清:
國產(chǎn)血清質(zhì)量差,這是*的,,主要原因并不是生產(chǎn)廠家的責(zé)任,,而是天然環(huán)境差和抗生素的大量使用。國內(nèi)環(huán)境污染嚴重,,同時飼養(yǎng)過程中抗生素極其濫用,,有毒有害物質(zhì)會大量殘留在血清中,zui終不利于細胞的生長,。
2,、南美血清:
來源很多,如巴拿馬,、烏拉圭,、巴西等,這些血清由于采血的不可控性,,質(zhì)量參差不齊,,當然,相對于國內(nèi)血清來說好的多,。另外,,國內(nèi)銷售的南美血清大多顏色鮮紅,但阿根廷的血清例外,,這可能和各國的采血,、生產(chǎn)工藝有關(guān)。
3,、北美血清:
主要來自美國和加拿大,。這類血清,,等級越高的顏色越淡,,表現(xiàn)為淡黃中帶一點微紅,特級胎牛血清基本就能進行干細胞培養(yǎng),。北美血清還有一個顯著特點就是每瓶血清都能溯源,,這對一些大型的疫苗廠、藥廠尤為重要,。
4,、澳洲血清:
來源主要是新西蘭和澳大利亞,這是在北美血清禁運之后進入中國市場的,,一般不具有溯源功能,,由于生產(chǎn),、運輸?shù)仍颍瑑r格相對來說比較貴,。
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