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當前位置:蒂科(上海)生物科技有限公司>>技術文章>>動物血清的正確熱滅活方法
動物血清的熱滅活非常容易造成蛋白析出增多,若非必要,,可以無需做此操作,。若必須做動物血清的熱滅活,請嚴格遵守以下步驟:
1,、保證血清*融化狀態(tài),,溫度接近常溫。
2,、保證水浴溫度56℃,、30分鐘的原則,在水浴過程中每隔2-3分鐘搖晃瓶子,,使血清內(nèi)部受熱均勻,,直至滅活時間結束。
注意事項:
溫度過高,、時間過久或搖晃不均勻,,都會造成沉淀物的增多,甚至嚴重影響血清的品質(zhì),。在56℃水浴中,,持續(xù)恒溫30分鐘。在此過程中每隔2-3分鐘搖晃瓶子,,使其受熱均勻,,減少蛋白的析出。
為什么要熱滅活血清,?
加熱可以滅活補體系統(tǒng),。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,,細胞和血小板釋放組胺,,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,,培養(yǎng)ES細胞,,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。
實驗顯示,,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,,或沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,,而造成細胞生長速率的降低,。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,,像是小黑點,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,,而把血清放在37℃環(huán)境中,,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增,。若非必須,,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間,,更確保血清的質(zhì)量!
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