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當(dāng)前位置:蒂科(上海)生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>支原體的相關(guān)知識(shí)您了解嗎,?
支原體早發(fā)現(xiàn)于1898年,,1956年Robinson等從細(xì)胞培養(yǎng)物中分離出支原體,,之后國(guó)內(nèi)外關(guān)于支原體污染細(xì)胞的報(bào)道屢見(jiàn)不鮮,。它廣泛存在于自然界中,有80余種,,污染細(xì)胞常見(jiàn)的支原體包括發(fā)酵支原體( M.fementans),、豬鼻支原體(M.hyorhinis)、口腔支原體(M.orale),、精氨酸支原體(M.arginina),、梨支原體(M.pirum)、唾液支原體(M.salivarium)和人型支原體(M.hominis),。
支原體通常附著在細(xì)胞的表面,,并影響其宿主細(xì)胞的生理、遺傳等多方面的正常功能,,用這些污染后貌似正常的細(xì)胞做試驗(yàn)或生產(chǎn),,將會(huì)嚴(yán)重影響結(jié)果。
1,、對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖和形態(tài)的影響
細(xì)胞培養(yǎng)物被支原體污染后生長(zhǎng)減慢,,且產(chǎn)生細(xì)胞病變(cyathic effect, CPE),表現(xiàn)為細(xì)胞體積增大,,碎片增多,,在細(xì)胞質(zhì)中產(chǎn)生一些顆粒;細(xì)胞內(nèi)病毒繁殖受阻,,使細(xì)胞形成空斑,。光鏡下形成不正常密度生長(zhǎng)的單層,貼壁細(xì)胞形成“流沙樣"脫落,、裂解,。某些支原體可在侵入細(xì)胞8h使線粒體膨脹,繼而被破壞,,細(xì)胞核wei縮呈空泡化,,細(xì)胞微管解聚,培養(yǎng)瓶中細(xì)胞與細(xì)胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積,細(xì)胞無(wú)法傳代,,甚至整個(gè)細(xì)胞群體溶解,。
2、對(duì)細(xì)胞代謝和功能的影響
有些被污染后的細(xì)胞,,雖形態(tài)上變化不明顯,,但培養(yǎng)液pH變化較大,更換培養(yǎng)液后幾小時(shí)就變酸,,培養(yǎng)基中的必需氨基酸被消耗掉,,如谷氨酸或核苷體,改變細(xì)胞代謝,。
支原體吸附在細(xì)胞表面,,破壞細(xì)胞膜的完整性,影響細(xì)胞信號(hào)傳遞,;消耗細(xì)胞的核苷庫(kù),,引起細(xì)胞染色體異常;發(fā)酵型支原體能迅速降解簡(jiǎn)單糖類,,代謝產(chǎn)生的酸能改變細(xì)胞的功能,;利用精氨酸的支原體則發(fā)生精氨酸效應(yīng),從而影響蛋白質(zhì)和核酸的合成,、導(dǎo)致細(xì)胞的分裂和生長(zhǎng)受阻,;引起細(xì)胞酶譜改變;由于支原體對(duì)細(xì)胞膜的吸附,,干擾膜受體的功能,,改變信號(hào)傳遞,破壞膜的完整性,。在單克隆抗體制備中,,骨髓瘤或雜交瘤細(xì)胞因支原體的污染而導(dǎo)致融合失敗或抗體分泌能力下降以至喪失。
3,、引起染色體異常
改變?nèi)旧w組型,,通常可導(dǎo)致細(xì)胞染色體斷裂,、數(shù)目減少,,出現(xiàn)雙著絲點(diǎn)染色體、環(huán)狀染色體等,。
4,、對(duì)免疫細(xì)胞產(chǎn)量的影響
支原體能影響巨噬細(xì)胞的活性,抑制干擾素的合成和降低其活性,,加大了繼發(fā)感染其他細(xì)菌和病毒的幾率,,同時(shí),通過(guò)植物血凝素干擾淋巴細(xì)胞的刺激、分化,。
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