大部分elisa檢測均以血清為標(biāo)本,。血清標(biāo)本可按慣例方法收集，應(yīng)留意防止溶血,，紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),，以HRP為符號的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可能會添加非特異性顯色,。血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測,。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,，也會發(fā)生假陽性反應(yīng),。

一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,。超越一周測定的需-20℃保存,。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮,，散布不均,，應(yīng)充沛混勻并防止發(fā)生氣泡?；鞚峄蛴谐练e的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,，弄清后再檢測,。重復(fù)凍融會使抗體效價下跌，所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作屢次檢測,，宜少量分裝冰存,。保存血清自收集時就應(yīng)留意無菌操作，也可參加適當(dāng)防腐劑,。

ELISA試劑盒檢測血清的詳細(xì)留意事項(xiàng)：

1) 要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血,。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有類似過氧化物的活性,，因而,，在以HRP為符號酶的ELISA測定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,，則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相,，然后與后邊參加的HRP底物反應(yīng)顯色。

2) 冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融,。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞效果,，然后引起假陰性結(jié)果。此外,，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意,，不要進(jìn)行劇烈振蕩，重復(fù)倒置混勻即可,。

3) 標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所造成的的混濁或絮狀物時,，應(yīng)離心沉積后取上清檢測。

4) 樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細(xì)菌污染,，一則細(xì)菌的成長,，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作符號的測定方法發(fā)生非特異性攪擾。

5) 血清標(biāo)本如是以無菌操作別離,，則可以在2～8℃下保存一周,，如為有菌操作，則主張冰凍保存,。樣本的長期保存,，應(yīng)在-70℃以下。