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1. 血清的保存溫度?
未拆封的血清應保存在-15℃至-20℃,,避免反復凍融,。拆封后的血清應無菌分裝成適當?shù)挠昧坎⒋娣庞?-15 ℃ 至 -20 ℃,2~8 ℃ 溶解后建議一個月內(nèi)使用,。
2. 血清的有效期是多久,?
大部分血清效期是 5 年,針對每個批次,,請通過質(zhì)檢文件確定具體效期日期,。
3. 血清應如何融解?
血清從冷凍箱取出后,,置于2~8℃冰箱使之融解,,不時規(guī)則地搖晃均勻,充分融解后分裝或使用,。
4. 為什么有時血清中出現(xiàn)沉淀,?是否需要去除?如何去除,?
血清中的白色沉淀主要是脂蛋白,、冷凝集素、玻連蛋白,、胎球蛋白,、磷酸鈣、膽固醇等,、絮狀沉淀物主要是纖維蛋白,。多種原因可能導致血清中沉淀的形成,常見的原因之一是融化過程中,,脂蛋白聚集所致,。該現(xiàn)象一般不會影響產(chǎn)品質(zhì)量。若需要去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以400g 稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因為血清中的絮狀物會阻塞過濾膜,。
5. 血清是否需要做滅活處理?
血清是否需要滅活取決于您的應用,。加熱可以滅活補體系統(tǒng),。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,,細胞和血小板釋放組胺,,激活淋巴細胞和巨噬細胞,。在免疫學研究,培養(yǎng)ES 細胞,,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,,推薦使用熱滅活血清。
滅活過程中,,會導致血清中某些成分被破壞,,如氨基酸,維生素,,生長因子等,。所以只有在您的實驗對血清有特殊要求時,才會考慮對血清進行滅活處理,。如您的實驗對血清中的某種組分敏感,,需要去除該組分。常見的情況是需要去除血清中的補體蛋白,,因為補體在機體中參與細胞殺傷,,巨噬細胞和淋巴細胞活化,肥大細胞和血小板組胺釋放,,平滑肌收縮等過程,,所以一般在免疫學相關(guān)研究中及肌細胞和干細胞的培養(yǎng)過程中需要對血清進行滅活處理。
6. 如何進行血清滅活處理,?
血清請先按上述「血清應如何融解」中的操作步驟融化和混勻,,熱滅活時請將血清置于 56 ℃ 水浴 30 分鐘。為盡量減少熱滅活對血清品質(zhì)的影響,,一次滅活的血清體積不宜過大,。最好準備同樣的容器裝相等體積的水(與血清相同溫度),滅活時將裝有血清和水的容器同時放入 56 ℃ 水浴, 在裝水的容器中放置溫度計,,加熱過程中不時輕輕旋轉(zhuǎn)混勻血清,,當溫度計顯示達到 56 ℃ 左右,開始計時,。56 ℃ 水浴后,,建議馬上轉(zhuǎn)移到冰上降溫。
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