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T/GHA-VSMC細(xì)胞人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞含STR鑒定
細(xì)胞培養(yǎng)物來(lái)源于原代外植體或分散的細(xì)胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細(xì)胞增殖形成匯合地單層細(xì)胞或密集地細(xì)胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義,*次收獲和接種的細(xì)胞被稱為原代細(xì)胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細(xì)胞生命周期有限,在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞大的生長(zhǎng)空間,以保持細(xì)胞群中基因型和表型的*性。
T/GHA-VSMC細(xì)胞人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞含STR鑒定
細(xì)胞系是不斷生長(zhǎng),,分化的細(xì)胞群,因其經(jīng)過(guò)遺傳改造,,致使其具有無(wú)限增長(zhǎng)的潛能,。體外生長(zhǎng)的細(xì)胞系用于醫(yī)療或科研。實(shí)際上,,連續(xù)細(xì)胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng),,隨著代數(shù)的增加細(xì)胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。
需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
2)倍增和代數(shù)有什么區(qū)別,?
倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)加倍,,通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生長(zhǎng)期。代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過(guò)程的次數(shù),,傳代培養(yǎng)的目的是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長(zhǎng),。
3)接收到的凍存細(xì)胞該如何處理?
收到包裝箱后,,立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存,。此過(guò)程盡量快以避免升溫。不要將細(xì)胞儲(chǔ)存在-80℃,,這樣會(huì)對(duì)細(xì)胞造成不可挽回的傷害,。
4)有多少經(jīng)驗(yàn)才能開(kāi)始正常人類細(xì)胞培養(yǎng)?
推薦有經(jīng)驗(yàn)者在無(wú)菌環(huán)境下用層流凈化罩工作,,如果有經(jīng)驗(yàn)的話對(duì)其它細(xì)胞類型也是很有利的,。如果你是細(xì)胞培養(yǎng)的初學(xué)者或打算建立細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室,我們會(huì)為你提供幫助,。請(qǐng)的細(xì)胞培養(yǎng)專家,。
5)凍存的細(xì)胞該如何開(kāi)始培養(yǎng)?
⑴將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,,注意保護(hù)手和眼睛,。
⑵用10秒鐘時(shí)間將小管的蓋子擰松1/4以去除殘留在螺紋處的液氮,然后將蓋子蓋緊,。
⑶將小管放入37℃水浴中,,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體*融化,。
⑷將小管立即從水浴中拿出,,擦干,轉(zhuǎn)入無(wú)菌環(huán)境,。
⑸用70%的酒精沖洗小管,然后擦去多余酒精,。
⑹打開(kāi)蓋子,,注意手指不要碰到里面的螺紋。用1ml離心管離心內(nèi)容物,。
⑺平衡管內(nèi)物,,用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶(多數(shù)細(xì)胞用T-75的培養(yǎng)瓶)。多數(shù)細(xì)胞類型推薦接種密度為每平方厘米5000細(xì)胞,。
⑻蓋好蓋子,,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開(kāi)蓋子,。
⑼將培養(yǎng)瓶放放培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)
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