H460,，人大細胞肺癌細胞常備細胞說明

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細胞樣本收集標準-收集貼壁細胞步驟：

1.移除細胞培養(yǎng)基。

2.沿著培養(yǎng)皿壁緩慢加入PBS（無鈣鎂離子）,，勿將細胞沖離培養(yǎng)皿,，溫和晃動培養(yǎng)皿，清洗細胞表面,。

3.移除PBS,。

4.加入細胞消化液（如胰蛋白酶等），使消化液能覆蓋所有細胞,。在37℃孵育2-3min,，溫和晃動培養(yǎng)皿知道細胞開始剝離培養(yǎng)皿。

5.加入培養(yǎng)基終止消化,，溫和重懸細胞

6.200X g,，離心10min，收集細胞

7.移除上清液,，用PBS清洗細胞沉淀兩次

8.后200X g,，離心10min,，收集細胞沉淀

收集懸浮細胞步驟：

1.將細胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管中

2. 200X g，離心10min,，收集細胞

3. 移除上清液,，用PBS清洗細胞沉淀兩次

4. 后200X g，離心10min,，收集細胞沉淀

送樣要求：

1. 基因組DNA: OD 260/280 在1.8～2.0之間, 濃度≥50ng/μl,體積≥20μl,；

2. 新鮮細胞：（1）細胞數(shù)≥10⁶；（2）貼壁細胞經(jīng)胰蛋白酶消化后,，離心收集細胞沉淀,；（3）懸浮細胞直接離心收集細胞沉淀；（4）PBS清洗細胞沉淀,，盡可能去除培養(yǎng)基與胰酶,；

3. 凍存細胞：細胞數(shù)≥10^6，凍存細胞從液氮罐中,，37℃水浴復蘇,，融化后離心收集細胞沉淀，盡可能去除凍存液,，否則會影響DNA抽提質(zhì)量,；

4. 樣本寄送：應(yīng)在送樣包裹中放置足量的冰袋或干冰，以減少在運輸過程中因溫度變化導致DNA降解的可能,；如無法使用冷凍寄送,，請將細胞沉淀用真空抽干（無殘留任何液體、不可加熱）,；

5. 為了保證DNA抽提質(zhì)量,，確保細胞在消化或凍存前，細胞狀態(tài)良好,，處于生長對數(shù)期,；

不建議以細胞懸液或細胞培養(yǎng)瓶形式寄送樣本

客戶須知：

1. 細胞系并非人體細胞，細胞來源的問題可能導致等位基因的不均一性,，從而使STR位點具有潛在不均一性,；

2. 八個位點+性別鑒定以外的位點為翼和贈送的非標準位點，翼和保證結(jié)果的真實性,，其復雜性會高于標準性位點.

備注：

1,、用戶在寄送樣品時，請將此表打印和樣品一并放入包裝中,，包裝用泡沫箱和冰袋,，建議順豐快遞；

2,、人源細胞,，公司會同DSMZ數(shù)據(jù)庫進行比較,；數(shù)據(jù)庫無該類型細胞，則需要用戶自行上網(wǎng)比較

寄送注意事項：細胞數(shù)量 10的6次方 左右 ,，然后離心收集沉淀（如果是貼壁 先消化一下,，如果是凍存的  先37度水浴復蘇10分鐘），收集沉淀離心后倒掉上清（用PBS清洗1遍,，避免PCR抑制劑殘留影響結(jié)果）,，放入泡沫箱  +冰袋+送樣單填好打印，用順豐速運,，寄給我們,。