“細胞空泡化”在細胞培養(yǎng)中也是一個常見問題,，它的出現(xiàn)原因有多種，實驗人員碰到往往會很頭疼,。

在文章中小編給大家列舉出了可能出現(xiàn)這種情況的原因,，方便大家進行分析選擇解決的方法。

可以引起細胞空泡化出現(xiàn)的原因有哪些那,？

1）細胞老化

原代細胞培養(yǎng)的過程中經(jīng)常出現(xiàn)這樣的情況,，是有些細胞處于終末分化狀態(tài)，不會再分裂,，時間長了就會空泡化而死亡,。

傳代細胞出現(xiàn)這種狀況比較少見，出現(xiàn)的原因一般都是因為細胞傳代次數(shù)過多,，老化嚴重,。

2）PH值

培養(yǎng)液的PH值與細胞正常所需PH值差別太大。

3）胰酶消化

 胰酶消化時間過長,，會導致細胞狀態(tài)受損,，有時也會出現(xiàn)這種情況。除此之外,，還有一個大家容易忽略的問題,在香港的一家科研機構(gòu)表明如果消化細胞吹打時力度過大,，產(chǎn)生太多氣泡，長期存在也會出現(xiàn)這種現(xiàn)象,。

4）自噬

細胞缺乏營養(yǎng)導致饑餓誘導形成自噬也會形成空泡化,，但是這種空泡在光學顯微鏡下是看不到的，只有在電鏡下才能觀察到,。

5）細胞代謝

在細胞培養(yǎng)過程中，由于血清濃度不夠,、藥物作用,、外界刺激等情況下導致細胞代謝出現(xiàn)問題,，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀況下會出現(xiàn)細胞空泡化的情況。

6）污染

衣原體感染：一旦一些細胞出現(xiàn)空泡化,，繼續(xù)培養(yǎng),，空泡范圍會擴大，即使傳代后也如此,，出現(xiàn)這種情況,，細胞基本無法挽救。后來檢測發(fā)現(xiàn),，此種細胞存在衣原體的感染,。

支原體污染：支原體污染在不嚴重的時候細胞是沒有什么明顯癥狀的，而且也無法通過光學顯微鏡觀察到,，只有在嚴重的時候會導致細胞狀態(tài)變差,，出現(xiàn)細胞空泡化的現(xiàn)象，細胞膜上也會出現(xiàn)小黑點附著,。

病毒污染：在文獻上也有說病毒污染也會導致細胞出現(xiàn)空泡化的情況,。

遇到細胞空泡化我們應(yīng)該如何解決？

1）如果是因為細胞老化的原因,，可以通過復(fù)蘇代數(shù)靠前的細胞進行培養(yǎng),。

2）如果是培養(yǎng)液PH的問題，可以通過更換培養(yǎng)液調(diào)整到合適的PH值,，再進行培養(yǎng),。

3）在傳代時，要選用合適濃度的胰酶和選取適當?shù)南瘯r間進行消化,，在操作時避免吹打太過用力出現(xiàn)太多氣泡,。

4）要保證細胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)充足，可以通過增加血清濃度和在培養(yǎng)基中加入谷氨酰氨解決,。

5）盡量使用質(zhì)量好和渠道正規(guī)的胎牛血清,，因為這樣的血清營養(yǎng)豐富且外源刺激因子少，可以有效的避免出現(xiàn)這類問題,。

6）在細胞培養(yǎng)時要嚴格進行無菌操作,，操作時要規(guī)范，減少污染的可能性,?？梢酝ㄟ^試劑盒檢測細胞是否污染，對于已經(jīng)污染的細胞滅菌后直接處理,，避免污染其他細胞,。