1,、實驗進行前，無菌室及無菌操作臺（laminarflow）以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,，并開啟無菌操作臺風扇運轉(zhuǎn)10分鐘后，才開始實驗操作,。每次操作只處理一株細胞株,，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細胞間污染,。實驗完畢后,，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,。操作間隔應讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘以上后,，再進行下一個細胞株之操作,。

　　2、無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,，必要物品,，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置,，其它實驗用品用完即應移出,，以利于氣流之流通。實驗用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi),。實驗操作應在抬面之中央無菌區(qū)域,，勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。

　　3,、小心取用無菌之實驗物品,，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,，亦不要在打開之容器正上方操作實驗,。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身,，傾斜約45°角取用,，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

　　4,、工作人員應注意自身之安全,，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染之細胞株應特別小心操作,，并選擇適當?shù)燃壷疅o菌操作臺（至少ClassⅡ）,。操作過程中，應避免引起aerosol之產(chǎn)生,，小心毒性藥品,，例如DMSO及TPA等，并避免尖銳針頭之傷害等,。

　　5,、定期檢測下列項目：5.1CO2鋼瓶之CO2壓力5.2CO2培養(yǎng)箱之CO2濃度、溫度,、及水盤是否有污染（水盤的水用無菌水,，每周更換）。5.3.無菌操作臺內(nèi)之a(chǎn)irflow壓力,，定期更換紫外線燈管及HEPA過濾膜,，預濾網(wǎng)（300小時/預濾網(wǎng)，3000小時/HEPA）。6.水槽可添加消毒劑（Zephrin1:750）,，定期更換水槽的水

　　6,、粉末培養(yǎng)基配制好后（加了血清），一般在4度盡量不要超過1個月,，如在-20度存放時間可長一些,，但也不要超過3-4個月，可能對于永生化細胞株來說要求不是太高,，細胞嬌弱,，放置時間不宜過長。

　　7,、開紫外線照射臺的時候,，就將培養(yǎng)基、酶,、DHANKS液那到室外讓它自然升溫,。這樣40分鐘后，溫度也升上來了,。有很多人將他放到37度水浴鍋里加熱,。一定要注意水浴鍋的衛(wèi)生，有的常年不清洗,，里面很臟,，容易在外面瓶身上吸附大量細菌。因此用它的也一定要勤換水,。從水浴鍋拿出后,，找個毛巾擦干上面的水。

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