磷酸化蛋白激酶BELISA試劑盒（種屬：人）

試劑盒名稱	磷酸化蛋白激酶B（PPKB）ELISA試劑盒
規(guī)格	48T/96T
品牌	RENJIEBIO
檢測(cè)方法	ELISA酶聯(lián)免疫法
檢測(cè)波長(zhǎng)	450nm
樣本	血清、血漿,、組織,、細(xì)胞上清液等
樣本體積	50~100ul
研究領(lǐng)域	神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝,、免疫學(xué)等
使用范圍	僅用于科研實(shí)驗(yàn)
保存	2~8℃,，避光保存

磷酸化蛋白激酶BELISA試劑盒（種屬：人）流程如下：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔,；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,，加入純細(xì)胞裂解液100μl,。　
（2）酶標(biāo)板置4℃,，包被過夜,。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后,，即甩去）,，之后將洗滌液注滿板孔,，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng),。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,。　
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),，孵育60min,。　
（6）洗板,，同（4）,。　
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl,?！?br />（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min,。　
（9）洗板,，同（4）,。　
（10）每孔加TMB顯色液 100μl,，輕輕混勻10s,，置37℃暗處反應(yīng)15-20min?！?br />（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng),。　
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,，zui終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2）,，以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后,，計(jì)算S/N值,。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

一,、高效,、靈敏、特異的抗體,；

二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,；

三、吸附性能好,，空白值低,，孔底透明度高的固相載體；

四,、適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標(biāo)本類型；

五,、*,，質(zhì)量保證，zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi),。

標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算

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