磷酸化蛋白激酶CELISA試劑盒(種屬:人)
試劑盒名稱 | 磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒 | ![]() |
規(guī)格 | 48T/96T | |
品牌 | RENJIEBIO | |
檢測方法 | ELISA酶聯(lián)免疫法 | |
檢測波長 | 450nm | |
樣本 | 血清、血漿,、組織,、細胞上清液等 | |
樣本體積 | 50~100ul | |
研究領域 | 神經(jīng)生物學,、新陳代謝,、免疫學等 | |
使用范圍 | 僅用于科研實驗 | |
保存 | 2~8℃,避光保存 |
磷酸化蛋白激酶CELISA試劑盒(種屬:人)流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,,每種樣品設3個平行孔,;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl,;另設一個空白對照孔,,加入純細胞裂解液100μl?!?br />(2)酶標板置4℃,,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,,浸泡1-2分鐘,,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復洗滌3-4次,。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,?!?br />(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min,?!?br />(6)洗板,同(4),?!?br />(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min,。
(9)洗板,,同(4),。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,,輕輕混勻10s,,置37℃暗處反應15-20min?!?br />(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應,。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,,計算S/N值,。S/N≥2.1為陽性判定標準。
產(chǎn)品優(yōu)勢:
一,、高效,、靈敏、特異的抗體,;
二,、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三,、吸附性能好,,空白值低,孔底透明度高的固相載體,;
四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型,;
五,、*,質量保證,,zui大限度的節(jié)省實驗經(jīng)費,。
標準曲線計算
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