Gibco胎牛血清(南美)10270-106
產(chǎn)品貨號: 10270-106
產(chǎn)品規(guī)格: 500ML
產(chǎn)品商標(biāo): GIBCO
Gibco胎牛血清(南美)10270-106
1,、 如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后,,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,。但必須注意的是,,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
長時間儲存在2-8℃時,,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素,、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁,。因此,,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復(fù)凍融,。
我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃,。若存放于4℃時,請勿超過一個月,。若一次無法用完一瓶,,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),,再放回冷凍。
2,、血清中包含絮狀沉淀,,它們是什么,怎么處理?
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白,。這是正常特性,,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,,離心血清(400g,,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾),。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,,使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃,,沉淀會自然消失。
3,、實驗室如何選擇適合的血清?
國內(nèi)*認(rèn)為HYCLONE的血清是的,,但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷,國外一般認(rèn)為GIBCO比HYCLONE好,,所以并不是價格決定質(zhì)量,,但是總的來說這兩種價格普遍偏貴,一般不是太嬌氣的細(xì)胞,,國產(chǎn)的就夠用了,。此外,由于國內(nèi)HYCLONE,,GIBCO并沒有生產(chǎn)線,,我們只能從代理商那里買,而代理商又魚龍混雜,,所以買到假貨的可能性也很大,。所以,我一般會從直銷員那里買血清,,有的國外生物公司由于剛剛進入中國,,度不高,但是其實在國外已經(jīng)做得很不錯了,,如Wisent等,,他們在國內(nèi)有辦事處,我會從那里拿,血清的品質(zhì)和HYCLONE不相上下,,但價格相對優(yōu)惠很多,。
4、 如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
(1)解凍血清時,,請隨時將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生,。
(2) 血清分裝凍存時,,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,。
(4) 勿將血清置于37℃太久,,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,,從而影響血清的品質(zhì),。
(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,,可以無須做此步驟,。
(6) 若必須做血清的熱滅活,,請遵守56℃,,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻,。溫度過高,,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多,。
5,、 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?
一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,,您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它,。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。
6,、 為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補體系統(tǒng),。激活的補體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,,細(xì)胞和血小板釋放組胺,,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,、平滑肌細(xì)胞時,,推薦使用熱滅活血清。
7,、 有必要做熱滅活嗎?
實驗顯示,,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進,,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,,而造成細(xì)胞生長速率的降低,。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,,而把血清放在37℃環(huán)境中,,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴增,。
若非必須,,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間,,更確保血清的質(zhì)量!
8,、細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?
一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài),,黑點是否游動,。如果細(xì)胞被污染,微生物則會大量繁殖,,培養(yǎng)基就會迅速變黃,、變混濁。污染包括細(xì)菌污染,、支原體污染等,。
如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,,與黑點出現(xiàn)前相比,,沒有任何變化,,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
(1)細(xì)胞生長過老,,破碎的細(xì)胞殘骸;
(2)血清質(zhì)量不好,,反復(fù)凍融的結(jié)果;
(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長;
(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì),、容器不合格,。可應(yīng)用離心,、過濾的方法去除這些黑點;
(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點,,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除,。
9,、 細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點生成?
(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
(2) 培養(yǎng)基無需37℃水浴。
(3) 培養(yǎng)基保持*PH值7.0- 7.2。
(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),,容器定期刷洗。
(5) 掌握細(xì)胞傳代的*時機,,細(xì)胞切勿生長過老。
10,、小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項?
來源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。
組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長因子,、促貼附因子,、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長,,而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,,使用濃度不同,,一般在5%-10%,,有特殊要求的濃度在20%。
血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,,若存放在4℃不可超過一個月,。解凍血清時 ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,,并經(jīng)常搖勻使之溶解,,然后至室溫放置使之升溫,不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,,如放在37℃解凍,,顏色加深,,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,,避免反復(fù)凍融。
胎牛血清
采用健康母牛懷孕的八月齡胎牛血液為原料,,經(jīng)無菌采集,、分離、微孔過濾后而成,。本產(chǎn)品無支原體,、無牛病毒、無噬毒體,、內(nèi)毒素含量低于1EU/ml,,適用于細(xì)胞、組織器官培養(yǎng),、細(xì)胞株保藏,、單抗研制,是醫(yī)院,、科研院校,、動物疫苗、生物制藥廠家重要培養(yǎng)基之一,。
保存血清的方法是什么,??上海信帆生物建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。但是,,若存放于?4℃時,,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),,再放回冷凍。反復(fù)凍融會對血清的品質(zhì)造成不良影響,。
胎牛血清
Fetal Bovine Serum產(chǎn)于澳大利亞,,血源以封閉的心臟穿刺方式采自8月齡胎牛,產(chǎn)品經(jīng)3次100nm過濾,,在凈化車間過濾包裝,。經(jīng)嚴(yán)格檢測確保無支原體,細(xì)菌病毒檢測依據(jù)美國藥典(USP)和美國聯(lián)邦法規(guī)第九篇(9CFR),,符合檢測標(biāo)準(zhǔn),。
總蛋白:3.5~5.0%,
內(nèi)毒素含量≤1.0EU/ml
血紅蛋白含量≤0.02%
pH:6.7~8.0
滲透壓(mom/Kg H2O):240~340
無菌檢驗:陰性
支原體—展示:陰性
病毒檢驗:陰性