人胰島素原  (PI)ELISA使用說(shuō)明書(shū)

胰島素原(PI)是胰島素的前體激素 ,， 它是由由胰島β細(xì)胞合成和分泌 ， 主要 在腎臟分解代謝,。生理情況下 ,，只有極少量的胰島素原釋放入血 ，在病理情 況下 ,，胰島β細(xì)胞釋放胰島素原增多 ,，血中胰島素原水平升高。 它是細(xì)胞在 裂解成成熟胰島素之前分泌的最后一個(gè)單鏈蛋白結(jié)構(gòu),。 它是由芝加哥大學(xué)的Donald F. Steiner教授在1967年發(fā)現(xiàn)的,。

本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA） 。往預(yù)先包被有人 胰島素原(PI)捕獲抗體的微孔中 ,，依次加入樣本,、標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記的檢測(cè) 抗體 ,，HRP  酶結(jié)合物 ,， 中間經(jīng)過(guò)溫育和洗滌 ，用底物TMB  顯色 ,，TMB 在過(guò) 氧化物酶(HRP)的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色 ,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色 的深淺和樣品中的人胰島素原(PI)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm  波長(zhǎng)下測(cè)定

吸光度（OD  值） ,，計(jì)算樣品濃度,。

靈敏度：4.79pg/mL

檢測(cè)范圍：12.5-800pg/mL

特異性：可檢測(cè)樣本中人的PI ，且與其類似物無(wú)明顯交叉反應(yīng),。

試劑盒性能：

1.    重復(fù)性 ：板內(nèi)變異系數(shù)小于  10% ,，板間變異系數(shù)小于  10%。

2.    回收率 ：在選取的健康人血清,、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入  3  個(gè)不同

濃度水平的人PI ,，計(jì)算回收率。

3.    線性稀釋：分別在選取的4份健康人血清,、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入

高濃度人PI ,，在標(biāo)準(zhǔn)曲線動(dòng)力學(xué)范圍內(nèi)進(jìn)行稀釋 ，評(píng)估線性,。